摘要:
目的观察α-平滑肌肌动融合蛋白(α-SMA-FP)对成纤维细胞收缩功能的影响.方法建立Wistar大鼠皮肤成纤维细胞三维立体凝胶培养模型.成纤维细胞在胶原凝胶中培养5 d后,实验组分别用5、10、50、100、250 mg/L的α-SMA-FP进行处理,根据α-SMA-FP剂量不同分为E1、E2、E3、E4和E5组.对照组分为空白对照(C1)组和250 mg/L α-骨骼肌肌动融合蛋白(α-SKA-FP)处理(C2)组.测量处理前后凝胶的直径,计算收缩率.检测E5组冲洗掉α-SMA-FP后(wash组)凝胶收缩率的变化情况.对传代后的成纤维细胞用α-SMA-FP或α-SKA-FP处理后进行α-SMA免疫荧光染色. 结果 C1和C2组凝胶收缩率为(58.6±3.1)%和(56.2±4.9)%,二者差异无显著性意义(P>0.05).E1~E5组的收缩率分别为(45.56±4.1)%、(42.3±4.2)%、(41.8±3.6)%、(37.6±5.8)%、(26.4±4.7)%,wash组收缩率为(48.2±4.9)%.E1~E5组与C1、C2组比较,差异均有显著性意义(P<0.05),与wash组比较,差异有非常显著性意义(P<0.01).α-SMA-FP着色于成纤维细胞纤维丝上,转染α-SMA时着色不明显,而用α-SMA-FP处理后,α-SMA着色明显. 结论α-SMA-FP可特异性抑制成纤维细胞收缩,且有剂量依赖效应,推测对瘢痕类疾病有治疗潜力.