Rho激酶在烧伤大鼠血清诱导的血管内皮细胞骨架变化中的作用

郑惠珍; 赵克森; 黄巧冰

Rho激酶在烧伤大鼠血清诱导的血管内皮细胞骨架变化中的作用

1. 广东医学院生理科学实验室,524023(原南方医科大学病理生理学教研室,广州510515);
2. 南方医科大学病理生理学教研室,广州510515

基金项目:

国家重点基础研究发展规划资助项目(G2000057004、G1999054202)

国家自然科学基金海外青年学者合作研究资助项目(30028008)

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出版历程
- 网络出版日期: 2021-10-28
- 刊出日期: 2005-06-20

Role of Rho kinase in reorganization of the vascular endothelial cytoskeleton induced by rat burn serum

1. Department of Patbophysiology.Key Laboratory for Shock and Mieroeireulation of PLA,The South Medieal University,Guangzhou 510515,P.R.China

摘要

摘要: 目的观察烧伤血清刺激下血管内皮细胞骨架的变化及Rho信号转导通路所起的作用. 方法常规培养人脐静脉血管内皮细胞系ECV304,随机分为空白对照组、实验对照组、烧伤组、Y-27632组、烧伤+Y-27632组、Y-27632+烧伤组、溶血磷脂酸(LPA)组和LPA+Y-27632组,分别用正常大鼠血清、烧伤大鼠血清、30 μmol/L Rho激酶抑制剂Y-27632、13 μmol/L RhoA激动剂LPA单独刺激或联合刺激.采用HE染色于光镜下观察各组内皮细胞形态.于荧光倒置相差显微镜下观察内皮细胞骨架变化,除Y-27632组外,各组均在刺激后6、7、8 h 3个时相点进行观察.用流式细胞仪检测实验对照组、烧伤组、Y-27632组、烧伤+Y-27632组、LPA 组和LPA+Y-27632组刺激6 h的肌动蛋白含量. 结果空白对照组、实验对照组细胞呈梭形或多边形,生长良好;丝状肌动蛋白主要分布在细胞周边,形成周边肌动蛋白丝带,细胞生长融合为单层后呈网状结构;球状肌动蛋白集中在细胞中央.烧伤组烧伤血清刺激6 h,细胞贴壁差,丝状肌动蛋白重组,应力纤维形成,周边肌动蛋白丝带模糊;球状肌动蛋白松散,胞浆中可见散在分布的絮状球状肌动蛋白,且这些反应随着刺激时间延长而增强.烧伤+Y-27632组或Y-27632+烧伤组细胞生长、贴壁良好,丝状肌动蛋白的分布与空白对照组、实验对照组相似,应力纤维明显减少或消失;球状肌动蛋白结构紧密.LPA组的细胞骨架变化与烧伤组相似,LPA+Y-27632组及Y-27632组细胞骨架无明显变化.烧伤组刺激后6 h丝状肌动蛋白含量为0.63±0.07,低于实验对照组0.75±0.08;球状肌动蛋白含量为1.28±0.27,高于实验对照组1.16±0.16, 但组间差异均无统计学意义(P>0.05). 结论烧伤血清能诱导内皮细胞肌动蛋白骨架重组,与LPA的作用相似.Y-27632能逆转这一作用.
- 溶血磷脂素类 /
- 内皮细胞 /
- 肌动蛋白类 /
- 烧伤血清 /
- Rho激酶