摘要: 目的观察Smac／DIABLO反义寡脱氧核苷酸（asODN）对H2O2引起的大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法将原代培养的新生Wistar大鼠心肌细胞随机分为正常对照组（不行转染）、对照组（单纯用脂质体处理）、错义寡脱氧核苷酸（scrODN）组（转染Smac／DIABLO scrODN）、asODN组（转染Smac／DIABLO asODN）、H2O2组（仅受H2O2刺激）、scrODN＋H2O2组（同scrODN组处理后受H2O2刺激）、asODN＋H2O2组（同asODN组处理后受H2O2刺激），Smac／DIABLO scrODN或asODN浓度均为4μmol／L，H2O2为0．5mmol／L。采用逆转录聚合酶链反应和蛋白质印迹法观察Smac／DIABLO mRNA和蛋白质表达水平的变化；采用hoechst 33258荧光染色，计算凋亡核百分率；抽提DNA行琼脂糖凝胶电泳，观察是否出现DNA“梯状”条带；采用半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspases）活性检测试剂盒观察caspase-3、caspase-9的活化情况。结果asODN组细胞Smac／DIABLO mRNA的表达明显受抑制，其蛋白质水平较正常对照组下降约80％；对照组、scrODN组、正常对照组此2项指标相近（P〉0．05）。正常对照组、scrODN组及asODN组凋亡核百分率低，且caspase-3、caspase-9的活性也处于低表达水平。H2O2组、scrODN＋H2O2组凋亡核百分率分别为（52±3）％、（55±5）％，均见典型DNA“梯状”条带，caspase-3、caspase-9活性均明显高于正常对照组（P〈0．01）；asODN＋H2O2组凋亡核百分率降至（19±5）％，且caspase-3、caspase-9活性明显低于scrODN＋H2O2组（P〈0．01），DNA“梯状”条带亦明显减少。结论Smac／DIABLO asODN能抑制H2O2所致大鼠心肌细胞的凋亡。