摘要:
目的了解核因子(NF)kB活化对烧伤血清诱导单核细胞活化分泌细胞因子的作用,探讨烧伤血清激活单核细胞的机制方法收集体外培养的人外周血单核细胞(PBMC),分别用正常人血清、烧伤患者血清、烧伤患苦血清+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)刺激后依次分为对照组、烧伤血清组、PDTC组、采用电泳迁移率分析法检测刺激前及刺激0.5、1、0、2.0、4、0h时PBMC的NF-kB活性;酶联免疫吸附测定法和原位杂交法检测刺激前及刺激1.0、2.0、4.0、6.0h时PBMC培养上清液中肿瘤坏死因子(TNF)α、白细胞介素(IL)8水平及TNF-α mRNA、IL-8 mRNA的表达情况。结果血清刺激后,烧伤血清组PBMC NF-kB活性迅速升高,刺激1.0h时达峰值(30.2±3.5)×10^4积分灰度值,与对照组(4.4±0.8)×10^4积分灰度值比较差异有统计学意义(P〈0.01)。刺激2、0h后逐渐下降;而PDTC组NF-kB活性无明显升高,刺激1.0h时为(6.8±0.9)×10^4积分灰度值。烧伤血清组刺激PBMC 1.0h时,TNF-α mRNA表达量和培养上清液中TNF-α水平即升高达峰值,并明显高于对照组(P〈0.01);IL-8 mRNA表达量和IL-8水平在刺激4.0h时达峰值,也明显高于对照组(P〈0.01);而PDTC组PBMC培养上清液中TNF-α刺激1.0h时达峰值(0.52±0.06)μg/L;刺激4.0h时IL-8达峰值(239±20)ng/L,与对照组[(0.13±0.07)μg/L、〈156ng/L]比较,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论烧伤血清可通过活化NF-kB,启动PBMC对细胞因子的合成和释放,提示NF-kB活化在烧伤血清诱导PBMC分泌细胞因子的过程中起重要作用。