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人脐血来源内皮祖细胞的纯化鉴定及定向分化的研究

谢松涛 陈璧 陶克

谢松涛, 陈璧, 陶克. 人脐血来源内皮祖细胞的纯化鉴定及定向分化的研究[J]. 中华烧伤杂志, 2006, 22(5): 355-358.
引用本文: 谢松涛, 陈璧, 陶克. 人脐血来源内皮祖细胞的纯化鉴定及定向分化的研究[J]. 中华烧伤杂志, 2006, 22(5): 355-358.
XIE Song-tao, CHEN Bi, TAO Ke. Purification, identification and oriented differentiation of endothelial progenitor cells from human umbilical cord blood[J]. Chin j Burns, 2006, 22(5): 355-358.
Citation: XIE Song-tao, CHEN Bi, TAO Ke. Purification, identification and oriented differentiation of endothelial progenitor cells from human umbilical cord blood[J]. Chin j Burns, 2006, 22(5): 355-358.

人脐血来源内皮祖细胞的纯化鉴定及定向分化的研究

Purification, identification and oriented differentiation of endothelial progenitor cells from human umbilical cord blood

  • 摘要: 目的 检测CD133^+血管内皮祖细胞(EPC)的细胞表面标志物,鉴定其生物学特性。方法 采用免疫磁珠法分离人脐血EPC,用EGM-2MV培养基[含表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)2等具有诱导分化作用的细胞因子]进行体外培养。应用流式细胞术、免疫组织化学等方法检测CD133^+细胞的比例、原代EPC的生长曲线及生长特性。透射电镜查找Weibel-Palade小体。同时设计EPC裸鼠成瘤实验,观察瘤体生长及血管增生情况,以鉴定EPC的生物学特性。结果 CD133^+细胞在免疫磁珠分离前后的比例各为0.91%及85.52%。EPC原代培养时细胞形态正常、密度均匀,前3d为相对抑制期,此后快速增殖,10d后达80%~90%融合。EPC生长曲线显示,接种后5d内细胞数量无明显变化,从第7天开始明显增加,第17天达高峰。光学显微镜下可见,原代EPC贴壁后呈梭形,接种后7d数量明显增加,呈克隆状生长。透射电镜观察到,细胞膜伸出许多伪足丝,基底膜呈多层;细胞质内可见一种短棒状小体,含平行管状的内部结构,即Weibel-Palade小体,确定其为EPC。裸鼠成瘤实验可见EPC组肿瘤瘕体及血管数量大于或多于对照组;抗人血管性假血友病因子(vWF)免疫荧光染色显示,大量EPC参与肿瘤血管生成。结论本实验分离培养的CD133^+细胞具有分化为成熟血管内皮细胞的能力,即为EPC。裸鼠成瘤实验初步证明EPC参与血管重建,具有促进血管新生、加速缺血组织血管化的作用。

     

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  • 网络出版日期:  2021-10-28
  • 刊出日期:  2006-10-20

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