摘要:
目的了解血红素氧合酶1(HO-1)对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法分离培养SD乳鼠心肌细胞,根据细胞悬液中所加刺激物的不同分为对照组(A组):常规培养;LPS组(B组):培养液中加入终浓度为30μmol/L的LPS,作用1h;LPS+氯化血红素(hemin)组(C组):加入终浓度为5μmol/L的hemin,作用1h后再加入30μmol/L的LPS作用1h;LPS+ZnPP组(D组):加入终浓度为3μmol/L的ZnPP—IX.作用1h后再加入30μmol/L的LPS作用1h。硫代巴比妥酸比色法及黄嘌呤氧化酶法测定各组心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量;检测心肌细胞节律、存活率及凋亡率;用反转录-PCR法检测HO-1mRNA表达;蛋白质印迹法检测心肌细胞HO-1、肿瘤坏死因子α(TNF—α)、核因子κB(NF—κB)的表达。结果B、C、D组LDH和MDA值分别为(113±15)、(79±13)、(154±22)U/L和(1.88±0.36)、(1.16±0.32)、(2.84±0.44)mmol/L,高于A组[(69±10)U/L、(0.87±0,25)mmol/L,P〈0.05],而以上3组的SOD值[(17.8±1.8)、(22.5±2.4)、(13.4±1.5)U/mL]却低于A组[(24.3±3.6)U/mL,P〈0.05]。B、C、D组心肌细胞节律、凋亡率均高于A组(P〈0.05),存活率低于A组(P〈0.05)。B、C、D组心肌细胞HO—1mRNA表达均高于A组(P〈0.05),其中C组最高。B、C、D组心肌细胞HO-1、TNF—α、NF—κB值均高于A组(P〈0.05).其中C组的HO-1值最高,D组TNF—α、NF—κB值最高。结论LPS对心肌细胞有明显的损伤作用。HO-1可能通过抗炎性反应、减轻氧化应激以及减少细胞凋亡途径,对心肌细胞产生保护作用。