摘要:
目的探讨同源盒B2 (HOXB2)基因在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖中的作用及血管内皮生长因子(VEGF)对HUVEC放射损伤的保护效应. 方法分离、培养HUVEC.(1)配制寡脱氧核苷酸(ODN)或反义ODN(ASODN)浓度为0.25、0.50、1.00、2.50 mg/L的脂质体-HOXB2-ASODN、脂质体-ODN,用以刺激HUVEC.以噻唑蓝(MTT)法和氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TdR)掺入法检测刺激后HUVEC增殖活性的变化,以流式细胞仪进行细胞周期分析,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HUVEC内HOXB2 mRNA的表达水平.(2)对HUVEC进行下述处理:加入50 μg/L VEGF;以6、12 Gy的60Co γ射线照射;12 Gy 60Co γ射线照射后加入50 μg/L VEGF.24、48 h后进行形态学观察,采用MTT法检测细胞增殖活性的变化. 结果 (1)与脂质体-ODN比较,脂质体-HOXB2-ASODN对HUVEC的增殖有明显抑制作用(P<0.05或0.001),且ASODN浓度越高变化越明显.2.50 mg/L的ASODN可明显减少HUVEC的S期细胞数量及HOXB2 mRNA表达水平(P< 0.01或0.001).(2)60Co γ射线照射可造成HUVEC核增大,胞浆多空泡,多核及核肿胀.当以6 Gy照射24、48 h时,细胞增殖活性分别由未照射时的0.365±0.047、0.487±0.022升至0.557±0.042、0.648±0.021;以12 Gy照射24、48 h时,则降至0.263±0.038、0.306±0.024(P<0.01).12 Gy照射后加入VEGF能明显改善细胞形态并促进其增殖. 结论 HOXB2对HUVEC的生物活性具有重要作用.小剂量60Co γ射线照射可引起HUVEC HOXB2表达增强,大剂量照射则使其表达降低,而VEGF对HUVEC具有抗放射损伤的作用.
点击查看大图
下载:
