反义寡核苷酸对人瘢痕疙瘩成纤维细胞结缔组织生长因子基因表达和胶原合成的作用

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Effects of antisense oligonucleotides on the expression of connective tissue growth factor gene and on the collagen synthesis in the cultured human keloid fibroblasts

1. The Department of Plastic Surgery,Southwest Hospital,The Third Military Medical University,Chongqing 400038,P.R.China

摘要: 目的研究结缔组织生长因子(CTGF)在人瘢痕疙瘩发病机制中的作用.方法体外分离、培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞(HKF).在脂质体介导下,将异硫氰酸荧光素标记的硫代磷酸化CTGF反义寡核苷酸(ASODN)转染至HKF中,设为CTGF ASODN治疗组(AT组),同时设脂质体对照组(LC组,仅加入脂质体)和空白对照组(C组,不加脂质体和ASODN).于荧光显微镜下观察CTGF ASODN在各组细胞中的分布;通过逆转录聚合酶链式反应检测细胞中CTGF mRNA指数(RI);采用3H-脯氨酸掺入法检测细胞的胶原合成量.结果转染后12 h, AT组细胞胞浆内可见大量荧光,LC、C组HKF内无此现象.AT组转染后48 h RI值为0.12±0.62,明显低于LC组值0.51±0.18及C组值0.54±0.35 (P<0.01).AT组的3H-脯氨酸掺入率为108.96±79.05,较LC组值171.24±14.99及C组值165.38±43.61低 (P<0.01).结论CTGF ASODN能够抑制体外培养的HKF中CTGF基因表达和胶原合成,表明CTGF在人瘢痕疙瘩纤维化进程中发挥了一定作用.
- 瘢痕疙瘩 /
- 成纤维细胞 /
- 寡核苷酸类，反义 /
- 胶原 /
- 基因表达 /
- 结缔组织生长因子