摘要: 目的了解成体大鼠心肌细胞微管解聚对线粒体分布、线粒体活性及细胞能量代谢的影响。方法分离培养成体SD大鼠及SD大鼠乳鼠心肌细胞，按随机数字表法分为：大（乳）鼠对照组（常规培养，不加任何刺激因素）、大（乳）鼠微管解聚剂组（用含终浓度8μmol／L秋水仙碱的培养液培养，作用30min）。（1）用蛋白质印迹法检测各组大鼠和乳鼠心肌细胞聚合态β微管蛋白表达量。（2）取2组大鼠心肌细胞，用蛋白质印迹法检测细胞色素c表达量；免疫荧光染色法观察细胞聚合态B微管蛋白、电压依赖型阴离子通道（VDAC）分布情况；免疫细胞化学法检测细胞线粒体内膜电位；噻唑蓝法测量细胞活性；采用高效液相色谱法，检测细胞ATP、腺苷二磷酸（ADP）、腺苷一磷酸（AMP）含量及能荷。结果（1）聚合态B微管蛋白表达量：大鼠微管解聚剂组为0．52±0．07，较大鼠对照组1．25±0．12明显减少（F=31．002，P=0．000）；乳鼠微管解聚剂组为0．76±0．12，较乳鼠对照组1．11±0．24显著减少（F=31．002，P=0．000），但明显高于大鼠微管解聚剂组（F=31．002，P=0．009）。（2）细胞色素e表达量：大鼠对照组为0．26±0．03，明显低于大鼠微管解聚剂组（1．55±0．13，t=-24．056，P=0．000）。（3）免疫荧光染色：大鼠对照组心肌细胞微管多呈线性管状、与心肌纤维平行分布；VDAC着色显示线粒体呈颗粒状与微管同向分布。大鼠微管解聚剂组微管正常排列规律被破坏，表现为免疫荧光强度减弱，微管结构不清晰、连续性丧失、粗糙；线粒体分布散乱。（4）线粒体内膜电位：大鼠对照组荧光强度为1288±84，明显高于大鼠微管解聚剂组（331±27，t=26．508，P=0．000）。（5）细胞活性：大鼠对照组吸光度值为1．75±0．11；大鼠微管解聚剂组为0．81±0．07，较前者明显降低（t=17．348，P=0．000）。（6）能量代谢：与大鼠对照组比较，大鼠微管解聚剂组心肌细胞ATP含量下降，ADP、AMP含量上升，ATP／ADP值与能荷均降低。结论在正常成体大鼠心肌细胞内，微管与线粒体分布方向一致。微管解聚后心肌细胞线粒体排列紊乱，细胞色素C从线粒体漏出，线粒体内膜电位下降、能量供应降低，细胞活性下降。