摘要:
目的 了解烫伤血清对体外培养的大鼠结肠平滑肌细胞骨架的影响,初步探讨伤后胃肠动力障碍的可能机制. 方法 分离培养健康成年Wistar大鼠结肠平滑肌细胞.另取2只健康成年Wistar大鼠,其中1只不致伤,另一只致深Ⅱ度烫伤,采集2只大鼠血液分离血清,用培养液配成体积分数20%的烫伤血清和体积分数20%的正常血清.采用随机数字表法将大鼠平滑肌细胞分为烫伤血清组和正常血清组,分别用2种血清培养.于处理1、3、6、12 h时(每组每时相点样本数均为10),用流式细胞仪检测细胞肌动蛋白表达水平,并采用蛋白质印迹法检测β微管蛋白的相对含量.对数据行t检验. 结果 (1)烫伤血清组细胞处理1、3、6、12 h时,肌动蛋白荧光强度分别为59±4、26±6、39±6、42±6,正常血清组分别为95±10、91±10、102±9、97±9,组间比较,差异均有统计学意义(t值分别为10.528、18.069、18.748、16.647,P<0.05或P<0.01);烫伤血清组组内比较,处理3 h时降至最低点,6、12 h持续回升.(2)烫伤血清组处理1、3、6、12 h时,β微管蛋白的相对含量分别为14.44±0.26、8.61±0.19、11.76±0.31、12.13±0.29;正常血清组分别为22.37±1.15、21.87±1.79、23.24±1.55、21.99±2.02,组间比较差异有统计学意义(t值分别为21.176、23.365、23.000、15.273,P值均小于0.01);烫伤血清组组内比较,处理3 h时达最低,6、12 h有所回升但势头缓慢.结论 烫伤血清作用初始阶段,可使体外培养的大鼠肠道平滑肌细胞骨架含量减少,随后细胞骨架含量呈回升趋势,这可能与平滑肌细胞对烫伤血清刺激的耐受、适应和自我修复有关.