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人内皮高表达脂多糖相关因子1多克隆抗体的制备

刘月明,  刘海荣,  蔡震,  马兵,  刘漪沦,  张玮

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刘月明, 刘海荣, 蔡震, 等. 人内皮高表达脂多糖相关因子1多克隆抗体的制备[J]. 中华烧伤杂志, 2010, 26(6): 452-455. Doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2010.06.016
引用本文: 刘月明, 刘海荣, 蔡震, 等. 人内皮高表达脂多糖相关因子1多克隆抗体的制备[J]. 中华烧伤杂志, 2010, 26(6): 452-455. Doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2010.06.016
shu
LIU Yue-ming, LIU Hai-rong, CAI Zhen, et al. Preparation of polyclonal antibody of human endothelial-overexpressed lipopolysaccharide-associated factor 1[J]. Chin j Burns, 2010, 26(6): 452-455. Doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2010.06.016
Citation: LIU Yue-ming, LIU Hai-rong, CAI Zhen, et al. Preparation of polyclonal antibody of human endothelial-overexpressed lipopolysaccharide-associated factor 1[J]. Chin j Burns, 2010, 26(6): 452-455. Doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2010.06.016
shu

人内皮高表达脂多糖相关因子1多克隆抗体的制备

doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2010.06.016

  • 1. 成都医学院第一附属医院烧伤整形科,610500;

  • 2. 四川省人民医院整形美容外科

基金项目: 

四川省教育厅科研项目（09ZA018）

国家自然科学基金（30672715）

Preparation of polyclonal antibody of human endothelial-overexpressed lipopolysaccharide-associated factor 1

  • 1. Department of Burns and Plastic Surgery, the First Affiliated Hospital of Chengdu Medical College, Chengdu 610500, China

    摘要
  • 摘要: 目的 制备人内皮高表达脂多糖相关因子 1（EOLA1）多克隆抗体,检测EOLA1在人脐静脉内皮细胞（HUVEG）中的表达.方法 复性成功表达EOLA1的蛋白样品（样品1和2）,二辛丁酸法检测2种蛋白样品浓度,应用肽质量指纹图谱（PMF）分析法对2种样品进行验证.采用与理论肽段符合率高的EOLA1蛋白样品免疫4只小鼠,同时取4只未免疫小鼠作对照.采集各小鼠血液分离血清,应用饱和硫酸铵盐析沉淀法纯化EOLA1多克隆抗体,ELISA法分析效价（数据以吸光度值表示）.蛋白质印迹法检测EOLA1在HUVEC中的表达.结果 蛋白样品1和2的浓度分别为0.124 16、0.132 15 mg/mL.PMF分析显示,样品1的理论肽段符合率为32%,样品2的理论肽段符合率为24%.选用蛋白样品1免疫小鼠,经检测抗体效价在1∶10 000以上;应用制备的EOLA1多克隆抗体可以检测到EOLA1蛋白在HUVEC中表达.结论 应用EOLA1原核表达蛋白免疫小鼠可以制备EOLA1多克隆抗体,并可用于检测EOLA1蛋白表达.

     

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  • 网络出版日期:  2021-10-28
  • 刊出日期:  2010-12-20

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