摘要: 目的探讨胰岛素对烫伤大鼠血清诱导大鼠骨骼肌成肌细胞株L6凋亡的调控作用及机制。方法体外培养L6细胞，按照随机数字表法分为对照组、烫伤血清组、胰岛素组和烫伤血清＋胰岛素组。在上述4组细胞培养液中分别添加体积分数20％正常大鼠血清、体积分数20％烫伤大鼠血清、体积分数20％正常大鼠血清＋100nmol／L胰岛素、体积分数20％烫伤大鼠血清＋100nmol／L胰岛素，孵育48h。行Hoechst33258染色，于倒置荧光显微镜下观察细胞凋亡形态并计数凋亡细胞；行膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素／碘化丙啶双标记染色，用流式细胞仪检测细胞凋亡率；蛋白质印迹法检测细胞磷酸化（P-）蛋白激酶B（Akt）、p-磷脂酰肌醇3激酶（P13K）、Bax、Bcl-2、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase-3）的蛋白表达量。对实验数据行组间或配对t检验。结果（1）倒置荧光照微镜下可见，烫伤血清组凋亡细胞为每视野（59．6±3．9）个，显著多于对照组、胰岛素组、烫伤血清＋胰岛素组[每视野（4．9±2．6）、（5．5±2．1）、（19．7±2．3）个，t值分别为28．53、29．86、21．53，P值均小于0．01]。（2）流式细胞仪检测结果硅示，烫伤血清组细胞凋亡率为（18．5±1．8）％，明显高于对照组、腆岛素组及烫伤血清＋胰岛素组[（1．1±0．6）％、（1．5±0．3）％、（7．8±0．6）％，t值分别为22．41、22．83、13．92，P值均小于0．01]。（3）蛋白质印迹检测显示，烫伤血清组Bax蛋白表达量（1．12±0．63）及活化easpase-3蛋白表达量（2．15±0．51）明照高于对照组（0．16±0．03、0．21±0．03，t值分别为3．80、10．69，P值均小于0．01），p-Akt蛋白发达量（0．20±0．03）明显低于对照组（0．42±0．07，t=-8．46．P〈0．01）；Bcl-2及p-PI3K蛋白表达量（0．19±0．03、0．17±0．03）与对照组（0．26±0．09、0．28±0．07）接近（t值分别为-2．73、-1．14，P值均大于0．05）。与烫伤血清组比较，烫伤血清＋胰岛素组Bax蛋白表达量（0．40±0．14）和活化easpase-3蛋白表达量（0．83±0．18）明显降低（t=-3．23，P〈0．05；t=6．66，P〈0．01），Bcl-2、p-Akt及p-PI3K蛋白表达量均升高（0．39±0．10、0．78±0．03、0．47±0．12．t值分别为4．07、18．71、5．05，P〈0．05或P〈0．01）。结论烫伤大鼠血清可显著促进骨骼肌成肌细胞凋亡，胰岛素能通过PI3K／Akt信号途径抑制细胞凋亡。