摘要:
目的探讨不同生长期人类瘢痕巾整合素连接激酶(ILK)表达及与血管生成的关系,方法(1)将笔者单位2009年12月-2010年12月收治的15例烧伤瘢痕忠背按德痕生长时间分为:小于6个月组、6~12个月组、大于12个月组.每组5例。采集各组瘢痕绀织,用免疫组织化学法观察ILK的表达分布,实时荧光定量RT—PCR法检测ILK mRNA的表达水平。(2)取小于6个月组瘢痕组织,分离培养瘢痕微血管内皮细胞(MEC),免疫磁珠法纯化后用花青类荧光染料Cy3标记的凝血因子Ⅷ进行鉴定,以人皮肤Fb为对照。取对数牛长期MEC,按随机数字表法分为3组:对照组,仪用含微m管生长添加剂的M131培养液培养;空质粒组,用空载质粒转染;ILK甄补DNA转染组,用ILK互补DNA表达质粒转染。转染24h后,实时荧光定量RT—PCR法榆测各组细胞中ILK、激胁功能区受体(KDR)、fms样酪氨酸激酶1(Flt—1)的mRNA表达情况。对数据进行单闪索方差分析.结果(1)小于6个月组瘢痕组织表皮荩底细胞、MEC及Fh胞质中均有ILK阳性表达,6~12个月组搬痕组织巾仅表皮基底细胞可见ILK阳性表达,大于12个月组瘢痕组织中ILK阳性表达不明显、(2)小于6个月组瘢痕组织中ILKmRNA表达水平(0.34±0.16)明显高于6~12个月组(0.17±0.06)及大于12个月组(0.07±0.13),F=37.007,P=0.000。(3)纯化后MEC旱铺路行样密集生长,胞质中凝血因子Ⅷ呈阳性表达;人皮肤Fb中未见凝血因子Ⅷ表达。(4)ILK瓦补DNA转染纰瘢痕MEC中ILK、KDR及FIt—1的mRNA表达水平分别为57.807±5.556、0.836±0.014、0.162±0.005,均姓著高于对照组的0.018±0.003、0.028±0.020、0.023±0.004和夺质粒组的0.042±0.005、0.039±0.007、0.046±0.003(F值分别为87.110、11.241、18.199,P值均小于0.01)。结论ILK主要表达于小于6个月的早期瘢痕组织中,并可以通过调节瘢痕MEC中的KDR及Flt-1mRNA表达米影响甲期瘢痕的咀管生成,在早期瘢痕增生过程巾具有重要作用。