Experimental study on the differentiation of human induced pluripotent stem cells into epidermal-like stem cells
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摘要: 目的探讨人诱导性多潜能干细胞(iPSC)向表皮样干细胞分化的可能性。方法(1)以经过灭活处理的小鼠胚胎Fb株作为滋养层,将人iPSC株接种于其上,加入胚胎干细胞完全培养液培养,Ⅳ型胶原酶消化法传代,倒置相差显微镜下观察人iPSC形态及生长状况并行碱性磷酸酶(AKP)染色。以胚胎干细胞不完全培养液悬浮培养iPSC,观察拟胚体形成能力。(2)将人iPSC接种于铺有人羊膜的6孔培养板培养,设为诱导组;另于未铺羊膜的6孔培养板上培养iPSC,作为对照组。观察2组iPSC形态,免疫细胞化学染色法检测整合素β1和细胞角蛋白19(CKl9)表达。结果(1)人iPSC在胚胎干细胞完全培养液中呈典型的干细胞克隆状生长,边界清楚,增殖旺盛;AKP染色阳性。iPSC在无滋养层条件下悬浮培养可形成拟胚体。(2)诱导组iPSC经培养4d后形成干细胞克隆,部分细胞整合素β1和CK19表达阳性。对照组细胞大量死亡,未见整合素β1和CK19表达。结论人iPSC在羊膜诱导下可定向分化为表皮样干细胞,有望成为皮肤组织工程新的种子细胞。
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