摘要: 目的了解Wnt／β连环蛋白信号在人正常真皮Fb向肌成纤维细胞（MFb）表型转化中的作用及机制。方法采用酶消化法分离培养人难常皮肤真皮Fb。（1）实验1。按随机数字表法将细胞分为4组：对照组，采用无血清DMEM培养液（以下简称培养液）培养；TGF-β1组，用含10ng／ml,氧组人TGF-β1（浓度下同）的培养液培养；Wnt3a组，用含150ng／mL重组人Wnt3a（浓度下同）的培养液培养；TGF-β1＋Wnt3a组，用含重组人TGF-β1和重组人Wnt3a的培养液培养。48h后，分别采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法，检测Fbβ连环蛋白和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的mRNA及蛋白表达水平：（2）实验2。按照随机数字表法将细胞分为4组：对照组、TGF-β1组，处理方法均同实验l；SB415286（糖原合酶激酶3β阻断剂）组，用含10μmol／LSB415286（浓度下同）的培养液培养；TGF-β1＋SB415286组，用含重组人TGF-β1和SB415286的培养液培养。48h后，分别采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测Fb α-SMA的tuRNA和蛋白表达水平；用免疫荧光细胞化学法检测α-SMA阳性表达情况。各项检测重复3次，对数据进行方差分析及LSD-t检验。结果（1）实验1：①β连环蛋白的mRNA表达水平：对照组、TGF-β1组、Wnt3a组和TGF-β1＋Wnt3a组Fb组间比较，差异无统计学意义（F=0．302，P=0．823）。②β连环蛋白的蛋白表达水平：4组比较，差异l有统计学意义（F=16.713，P=0．001），与对照组表达水平（0．34±0．11）相比，TGF-β1组、Wnt3a组均显著上调（0．73±0．12、0．82-0．17，t值分别为3．028、3．727，P〈0．05或P〈0．01）。TGF-β1＋Wnt3a组（1．23±0．21）显著高于其余3组（t值分别为6．911、3．883、3．184，P值均小于0．01）。③α-SMAmRNA表达水平：4组比较，差异有统计学意义（F=31．830，P=0．001）；与对照组相比，TGF-β．组硅著上调，wnt3a组下调分别为6．759、2．535，P〈0．05或P〈0．01）；TGF-β1＋Wnt3a组低于TGF-β1组（t=4．532，P〈0．01），④α-SMA蛋白表达水平：对照组、TGF-α1组、Wnt3a组、TGF-p1＋Wnt3a组分别为0．83±0．17、1．43±0．20、0．534±0．12、0．89±0．14（F=16．597，P=0．001）．．与对照组相比，TGF-β1组显著下凋，Wnt3a组下调（t值分别为4．582、2．291，P〈0．05或P〈0．01）；TGF-β11＋Wnt3a组低于TGF-β1组（t=4．123，P〈0．01）。（2）实验2①α-SMAmRNA表达水平：4组比较，差芹有统计学意义（F=34．101，P=0．001）。SB415286组明显低于对照组（F=2．511，P〈0．05），TGF-β1＋SB415286的明显低于TGF-β1组（t=3．587，P〈0．01）②α-SMA蛋白表达水平：4组细胞比较，差异有统计学意义（F=11．381，P=0．003），SB415286绀显著低于对照组（t=2．364，P〈0．05），TCF-β1＋SB415286组低于TGF-β1组（t=2．556，P〈0．05）。③免疫荧光细胞化学法检测显示，对照组α-SMA表达微弱；TGF-β1组α-SMA表达较对照组显著增强（t=11．198，P〈0．01）；SB415286组表达较对照组减少，TGF-β1＋SB415286组表达较TGF-β1组湿著减少（t=5．902，P〈0．01）。结论Wnt／β连环蛋白信号可能参与Fh细胞表型转化，并且对TGF-β1所介导的促转化效应起负性调控作用。