摘要: 目的 探讨高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对严重烧伤大鼠枯否细胞（KC）分泌促炎性细胞因子的影响及晚期糖基化终末产物受体（RAGE）在该过程中的作用。方法 将32只SD大鼠背部浸于98 ℃水中12 s，制成30%TBSA Ⅲ度烫伤（以下称烧伤）。伤后24 h，处死大鼠分离肝脏KC（32个样本），以每孔1×106个接种至24孔板中。（1）取部分细胞按随机数字表法分为2组，每组样本数为8。对照组，加入1 mL PBS液培养；HMGB1组，加入1 mL 浓度为100 ng/mL HMGB1刺激。培养48 h后，采用蛋白质印迹法检测细胞表面RAGE的表达（结果以灰度值比值表示）。（2）取部分细胞采用随机数字表法分为4组，每组样本数为8。对照组，加入1 mL PBS液培养；HMGB1组，加入1 mL 浓度为100 ng/mL HMGB1刺激；HMGB1＋抗RAGE抗体组，经1 mL 浓度为20 μg/mL抗大鼠RAGE单克隆抗体孵育2 h，加入1 mL浓度为100 ng/mL HMGB1刺激；HMGB1＋重组大鼠RAGE/Fc 嵌合体（rrRAGE/Fc）组，将0.5 mL浓度为100 ng/mL HMGB1 与0.5 mL浓度为5 μg/mL rrRAGE/Fc孵育2 h后，作用于细胞。培养48 h后，采用ELISA法检测细胞培养上清液中TNF-α 和IL-1β的含量，RNA印迹法检测细胞内TNF-α和IL-1β mRNA的表达水平（结果以灰度值比值表示）。对数据进行单因素方差分析、t检验及LSD检验。结果 （1）培养48 h后，HMGB1组细胞RAGE表达水平（1.036±0.101）明显高于对照组（0.191±0.024，t=-23.158，P=0.000）。（2）HMGB1组、HMGB1＋抗RAGE抗体组以及HMGB1＋rrRAGE/Fc组细胞培养上清液中TNF-α含量分别为（10.59±1.39）、（9.91±1.68）、（11.51±2.27）ng/mL，IL-1β含量分别为（2.49±0.33）、（2.08±0.32）、（2.42±0.42）ng/mL；细胞内TNF-α mRNA水平分别为0.311±0.009、0.301±0.047、0.326±0.016，IL-1β mRNA水平分别为0.237±0.021、0.244±0.041、0.245±0.013，3组间比较差异均无统计学意义（P值均大于0.05），均显著高于对照组［细胞培养上清液中TNF-α 和IL-1β含量分别为（2.69±0.14）、（0.43±0.05）ng/mL，细胞内TNF-α和IL-1β mRNA水平分别为0.140±0.022、0.077±0.005，P值均小于0.01］。结论 HMGB1可引起严重烧伤大鼠KC 分泌促炎性细胞因子TNF-α 和IL-1β，但RAGE在这一过程中未起主导作用。