摘要: 目的了解碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌的耐药机制及同源性。方法2012年1-9月，收集从笔者单位收治的烧伤、重症肺炎、糖尿病、慢性阻塞性肺炎、心肌炎、肝移植、脑出血患者的痰液、尿液、血液、脓液、引流液中分离的铜绿假单胞菌（经鉴定）812株。采用全自动微生物鉴定及药敏分析系统测定菌株对哌拉两林、亚胺培南等15种临床常用抗菌药物的耐药性。针对碳青霉烯类抗牛素耐药菌株，采用亚胺培南一乙二胺四乙酸（EDTA）协同试验及亚胺培南-EDTA和头孢他啶-EDTA增效试验筛选产金属B内酰胺酶（MBL）菌株，改良Hodge试验筛选产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶（KPC）菌株；PCR法检测菌株的碳青霉烯酶基因、质粒介导喹诺酮类耐药（PMQR）基闲及可移动基因元件，对比分析碳青霉烯酶基闲阳性和阴性菌株PMQR基因携带水平；肠杆菌基闪间重复共有序列（ERIC）-PCR法对菌株进行基闲分型，分析同一谱型菌株的来源及耐药基因。对数据行Fisher确切概率法分析。结果812株铜绿似单胞菌对头孢曲松和复方磺胺甲噁唑的耐药率高，分别为83．07％和88．19％；对其他l3种抗生素耐药率为17．30％～55．18％。共筛选出24株碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌，其叶11l株产MBI．、2株产KPC。碳青霉烯酶基闶检测，检出1l株携带VIM-2酶基l矧blaVIM-2，占45．83％；2株携带KPC-2酶基因blakpc＂占8．33％。PMQR基因检测，检出14株仅携带acc（6t）-Ib-Cr基因，占58．33％；3株（12．50％）同时携带aCC（6）-lb-cr、qnr基因（包括l株qnrAl、2株qnrB4）。可移动基因元件检测，检l叶J10株仅携带ISCRl基因，占41．67％；6株携带ISEep】基因，占25．00％；3株同时携带前2种基因，占12．50％；1株同时携带1类整合子基因、ISEepl荩斟，占4．17％。13株碳青霉烯酶基因阳性菌株中12株携带1或2种PMQR基因，显著高于碳青霉烯酶基川阴性菌株PMQR基因携带水平（仅5株携带1种，P=0．023）。ERIC-PCR分型显示24株铜绿似单胞菌共分成了6个谱型，A型13株占54．17％，标本主要来源于烧伤科，其中脓液和血液标本最多，8株同时携带blaVIM-2、（／CC简0-lb-er和ISCRI基闪；B型5株占20．83％，标本主要为ICU病区痰液标本，其中2株同时携带碳青霉烯酶基刚、PMQR基因、可移动基因元件；C、D型各2株，均^8．33％，各谱型菌株均来门不同科室，携带不同类型耐药基因；E、F型各l株，均占4．17％。结论笔者单位2012年铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制以产VIM-2的MBI。为主，其次为KPC-2；A型为最流行基凼型；碳青霉烯酶基因与PMQR基因存在共同携带现象，且多为克隆株的流行。