摘要: 目的 探讨低氧处理人表皮细胞株HaCaT不同时间对其运动和增殖的影响. 方法 （1）取对数生长期HaCaT细胞,用含体积分数10％ FBS的RPMI 1640培养液（培养方法下同）培养,按随机数字表法（分组方法下同）分为正常对照组（常规培养,下同）以及低氧1、3、6h组,每组6孔,后3组细胞于含体积分数5％二氧化碳、2％氧气、93％氮气的环境中（低氧培养条件下同）分别培养相应时间.活细胞工作站下观察各组细胞在3h内的运动范围,计算细胞曲线运动速度及直线运动速度.（2）取对数生长期HaCaT细胞分为正常对照组以及低氧1、3、6、9、12、24 h组,每组20孔,后6组细胞分别行相应时间低氧培养.采用细胞计数试剂盒与酶标仪检测细胞增殖情况（以吸光度值表示）.（3）取对数生长期HaCaT细胞分为正常对照组以及低氧1、3、6、24 h组,每组5孔,后4组细胞分别行相应时间低氧培养.蛋白质印迹法检测增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白水平.对数据行单因素方差分析、Dunnett-t检验. 结果 （1）与正常对照组比较,低氧1、3、6h组细胞的运动范围明显增大,低氧培养时间越长,增加幅度越大.低氧1、3、6h组细胞在观察1、2、3h的曲线运动速度分别为（43±18）、（44±17）、（43±16） μm/h,（44±16）、（44±14）、（45±14） μm/h,（55±19）、（54±17）、（56±18） μm/h,显著高于正常对照组的（33±13）、（33±12）、（33±10） μm/h（t值为2.840～9.330,P＜0.05或P＜0.01）;低氧6h组细胞曲线运动速度显著高于低氧1、3 h组（t值为3.474～ 4.545,P＜0.05或P＜0.01）.各组内各观察时相点间细胞曲线运动速度相近（F值为0.012～0.195,P值大于0.05）.低氧1h组观察1h细胞直线运动速度为（22±11） μm/h,显著高于正常对照组的（15±10）μm/h（t=2.697,P＜0.01）;观察1、2、3h,低氧3、6 h组细胞直线运动速度分别为（19±14）、（12±8）、（10±6）μm/h,（32±19）、（21±13）、（17±12） μm/h,显著高于正常对照组[观察2、3h分别为（9±7）、（6±5） μm/h,t值为1.990 ～8.231,P＜0.05或P＜0.01];低氧6h组细胞直线运动速度显著高于低氧1、3h组（t值为3.394～6.008,P＜0.05或P＜0.01）.与观察1h比较,各组观察2、3h细胞直线运动速度均显著降低（t值为-8.208 ～-4.232,P值均小于0.01）;正常对照组观察2、3h细胞直线运动速度差异明显（t=-1.967,P＜0.05）.（2）正常对照组以及低氧1、3、6、9、12、24 h组细胞增殖水平分别为1.11±0.08、1.36±0.10、1.39±0.05、1.38±0.05、1.10±0.14、1.06±0.09、0.99±0.06（F=39.19,P＜0.01）.与正常对照组比较,低氧1、3、6h组细胞增殖水平显著升高（t值分别为6.639、7.403、7.195,P值均小于0.01）,低氧24 h组细胞的增殖水平显著降低（t=-3.136,P＜0.05）;与低氧1、3、6h组比较,低氧9、12、24 h组细胞的增殖水平均显著降低（t值为-10.538～-6.775,P值均小于0.01）.（3）正常对照组以及低氧1、3、6、24 h组细胞PCNA蛋白水平分别为0.93±0.12、0.97±0.14、1.62±0.18、0.95±0.09、0.66±0.21（F=20.11,P＜0.01）.与正常对照组比较,低氧1、3、6h组细胞PCNA蛋白水平显著升高（t值分别为2.339、5.783、2.235,P＜0.05或P＜0.01）,低氧24 h组细胞PCNA蛋白水平显著降低（t=-1.998,P＜0.05）.低氧3h组细胞PCNA蛋白水平显著高于低氧1、6h组（￡值分别为4.312、3.947,P值均小于0.01）,该3组细胞PCNA蛋白水平均显著高于低氧24 h组（￡值分别为2.011、6.193、3.287,P＜0.05或P＜0.01）.结论 短时（1、3、6h）低氧处理可对HaCaT细胞的运动及增殖发挥促进作用,处理6h后细胞运动能力提高幅度最大,处理3、6 h对细胞增殖能力的促进作用更明湿.