摘要: 目的 观察大鼠严重烫伤早期心肌组织中微小RN A-21以及程序性细胞死亡因子4 (PDCD4)的表达变化,在细胞水平验证两者关系,初步探讨微小RN A-21参与大鼠严重烫伤早期心肌损害的分子机制. 方法 (1)将40只SD大鼠按随机数字表法分为假伤组8只(致假伤)和烫伤组32只(背部致30％ TBSAⅢ度烫伤).假伤组伤后不予补液,lh后处死取左心室组织;烫伤组伤后经腹腔注射乳酸林格液,于伤后3、6、12、24 h分别处死8只大鼠取左心室组织.实时荧光定量RT-PCR法检测心肌组织中微小RNA-21的表达水平,蛋白质印迹法检测心肌组织中PDCD4蛋白表达.(2)取大鼠心肌细胞株H9C2按随机数字表法分为微小RNA-21拮抗剂组(转染微小RNA-21拈抗剂)和转染对照组(转染微小RNA拮抗剂阴性对照).转染后48 h实时荧光定量RT-PCR法和蛋白质印迹法分别测定心肌细胞PDCD4的mRNA和蛋白表达水平.对数据行单因素方差分析、ISD-t检验、两独立样本t检验,对大鼠心肌组织微小RNA-21表达与PDCD4蛋白水平行直线相关分析. 结果 (1)假伤组伤后lh及烫伤组伤后3、6、12、24 h大鼠心肌组织微小RNA-21的相对表达量分别为0.96±0.13、0.44±0.08、0.42 ±0.10、0.33±0.07、0.61±0.10(F=27.331,P＜0.001).与假伤组伤后1h比较,烫伤组伤后3、6、12、24 h心肌组织微小RNA-21水平均明显下降(t值为4.558～9.410,P值均小于0.01).假伤组伤后1h及烫伤组伤后3、6、12、24 h大鼠心肌组织PDCD4蛋白的相对表达量分别为0.44±0.05、0.60±0.09、0.92±0.15、0.86±0.11、0.57±0.10(F=8.622,P=0.003),其中烫伤组伤后6、12 h表达量显著高于假伤组伤后1 h(t值分别为4.968和4.122,P值均小于0.01).烫伤组大鼠各时相点心肌组织微小RN A-21表达水平与PDCD4蛋白表达水平呈明显负相关(r=-0.572,P=0.026).(2)微小RNA-21拮抗剂组心肌细胞PDCD4的mRNA和蛋白的相对表达量分别为1.73±0.29和0.38±0.08,明显高于转染对照组的0.95±0.14和0.23±0.03(t值分别为4.857和3.356,P＜0.05或P＜0.01). 结论 大鼠严重烫伤早期心肌组织微小RNA-21表达下降,PDCD4表达升高,微小RNA-21可能通过负向调节PDCD4表达而参与烫伤早期心肌损伤。