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细胞外热休克蛋白70对严重烫伤大鼠肠道免疫功能的影响

邓鸿敖 张红艳 熊林朋 彭燕

邓鸿敖, 张红艳, 熊林朋, 等. 细胞外热休克蛋白70对严重烫伤大鼠肠道免疫功能的影响[J]. 中华烧伤杂志, 2016, 32(5): 272-276. Doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2016.05.004
引用本文: 邓鸿敖, 张红艳, 熊林朋, 等. 细胞外热休克蛋白70对严重烫伤大鼠肠道免疫功能的影响[J]. 中华烧伤杂志, 2016, 32(5): 272-276. Doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2016.05.004
Deng Hong'ao, Zhang Hongyan, Xiong Linpeng, et al. Effects of extracellular heat shock protein 70 on intestinal immune function of rats with severe scald injury[J]. Chin j Burns, 2016, 32(5): 272-276. Doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2016.05.004
Citation: Deng Hong'ao, Zhang Hongyan, Xiong Linpeng, et al. Effects of extracellular heat shock protein 70 on intestinal immune function of rats with severe scald injury[J]. Chin j Burns, 2016, 32(5): 272-276. Doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2016.05.004

细胞外热休克蛋白70对严重烫伤大鼠肠道免疫功能的影响

doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2016.05.004
基金项目: 

国家自然科学基金 (30960401)

Effects of extracellular heat shock protein 70 on intestinal immune function of rats with severe scald injury

  • 摘要: 目的 了解严重烫伤大鼠肠道细胞外热休克蛋白70(eHSP70)与IL-2表达变化及两者间的关系,另体外观察eHSP70对严重烫伤大鼠肠道派伊尔结CD3T淋巴细胞的影响。 方法 (1)取60只雄性SD大鼠,按随机数字表法分为正常对照组(仅麻醉)10只、烫伤组50只,烫伤组大鼠背部造成30%TBSAⅢ度烫伤。正常对照组于麻醉后即刻,烫伤组于伤后3、6、12、24、48 h,各取10只大鼠处死,取小肠组织,ELISA法检测eHSP70和IL-2的表达并进行相关分析。(2)另取2只雄性SD大鼠,同前致伤后12 h,分离小肠派伊尔结CD3T淋巴细胞,用含体积分数10%FBS的RPMI 1640培养液培养,按随机数字表法分为空白对照组和5、10、20 μg/mL eHSP70组,每组6孔。空白对照组不行其他处理,后3组培养液中分别加入相应质量浓度重组大鼠eHSP70。培养48 h,流式细胞仪检测CD3T淋巴细胞中Th1和Th2百分比及细胞凋亡率,ELISA法检测细胞培养上清液中IL-2和IL-10的表达。细胞实验均重复10次。对数据行单因素方差分析、Kruskal-Wallis秩和检验、SNK-q检验、Pearson相关分析。 结果 (1)与正常对照组的(1 278±135)、(48.6±4.9)ng/mg比较,烫伤组大鼠伤后3、6、12、24、48 h肠道eHSP70[(728±93)、(412±31)、(314±21)、(528±40)、(1 028±97)ng/mg]和IL-2[(38.6±2.3)、(32.3±1.0)、(25.3±3.6)、(33.9±4.1)、(44.3±2.6)ng/mg]水平均明显降低(q值为3.48~5.32,P值均小于0.05),均于伤后12 h达最低值。IL-2和eHSP70水平呈明显正相关(r=0.920,P<0.01)。(2)与空白对照组的(8.6±1.1)%、(3.75±0.45)%比较,5、10、20 μg/mL eHSP70组CD3T淋巴细胞中Th1百分比明显增高[(11.3±2.1)%、(15.7±1.8)%、(10.8±1.5)%,q值为2.97~4.57,P值均小于0.05],Th2百分比明显降低[(2.39±0.38)%、(1.05±0.23)%、(2.67±0.26)%,q值为2.48~4.32,P值均小于0.05]。与空白对照组的(34.3±2.2)%、(254±16)pg/mL比较,5、10、20 μg/mL eHSP70组CD3T淋巴细胞凋亡率明显降低[(26.1±2.6)%、(20.7±1.5)%、(31.5±2.4)%,q值为3.47~4.95,P值均小于0.05],细胞培养上清液中IL-2水平明显增高[(417±22)、(587±19)、(307±27)pg/mL,q值为3.02~4.98,P值均小于0.05]。4组CD3T淋巴细胞培养上清液中IL-10水平相近(F=2.12,P>0.05)。 结论 大鼠严重烫伤后肠道中eHSP70和IL-2的表达均降低,且两者呈明显正相关。eHSP70可体外促进严重烫伤大鼠肠道派伊尔结中CD3T淋巴细胞向Th1方向分化,明显降低其凋亡率,促进其释放IL-2。

     

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出版历程
  • 收稿日期:  2015-08-18
  • 网络出版日期:  2021-10-28
  • 刊出日期:  2016-05-20

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