胎儿附属物来源细胞的培养冻存
Isolation, culture and cyropreservation of ceils derived from fetal appendages
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摘要: 目的研究从胎儿附属物中分离培养及冻存细胞的较佳方法，以期为组织工程、细胞治疗和基因治疗提供种子细胞。方法取足月产胎儿脐带和胎盘，用酶消化法获得细胞，用相应培养液进行培养传代。将胎盘、脐带组织块冻存，检测加入不同浓度抗冻剂二甲亚砜的组织复苏后的活细胞率，透射电镜下观察其超微结构，并与新鲜组织进行比较；冻存培养所得人脐带血管周细胞和胎膜贴壁细胞的原代细胞，用免疫化学法检测冻存前后各自免疫表型的表达。结果新鲜脐带组织活细胞率为67．0％，抗冻剂体积分数为5％、10％、15％、20％时，冻存复苏脐带组织的活细胞率分别为23．4％、55．5％、48．8％、31．8％。抗冻剂体积分数为10％时，冻存复苏组织与新鲜组织活细胞率最接近（P〉0．05），体积分数为5％和20％时与新鲜组织该指标比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；透射电镜观察结果与之吻合。胎盘组织与脐带组织的情况类同。细胞冻存后免疫表型无明显变化。结论本方法可以从胎儿附属物中分离培养出大量种子细胞，冻存复苏后细胞免疫表型未发生改变，抗冻剂体积分数为10％时效果最好。
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Key words:
- Umbilical cord /
- Placenta /
- Cell culture technique /
- Cyropreservation /
- Dimethylsulfoxide
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