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刺五加皂苷E对人增生性瘢痕成纤维细胞生长的影响及其机制

林时秀 郭冰玉 回蔷 陶凯

林时秀, 郭冰玉, 回蔷, 等. 刺五加皂苷E对人增生性瘢痕成纤维细胞生长的影响及其机制[J]. 中华烧伤杂志, 2021, 37(3): 279-287. DOI: 10.3760/cma.j.cn501120-20200219-00072
引用本文: 林时秀, 郭冰玉, 回蔷, 等. 刺五加皂苷E对人增生性瘢痕成纤维细胞生长的影响及其机制[J]. 中华烧伤杂志, 2021, 37(3): 279-287. DOI: 10.3760/cma.j.cn501120-20200219-00072
Lin Shixiu, Guo Bingyu, Hui Qiang, et al. Effects and mechanism of eleutheroside E on the growth of human hypertrophic scar fibroblasts[J]. Chin j Burns, 2021, 37(3): 279-287. DOI: 10.3760/cma.j.cn501120-20200219-00072
Citation: Lin Shixiu, Guo Bingyu, Hui Qiang, et al. Effects and mechanism of eleutheroside E on the growth of human hypertrophic scar fibroblasts[J]. Chin j Burns, 2021, 37(3): 279-287. DOI: 10.3760/cma.j.cn501120-20200219-00072

刺五加皂苷E对人增生性瘢痕成纤维细胞生长的影响及其机制

doi: 10.3760/cma.j.cn501120-20200219-00072
基金项目: 

国家自然科学基金 (81971845)

Effects and mechanism of eleutheroside E on the growth of human hypertrophic scar fibroblasts

  • 摘要:

    目的 探讨刺五加皂苷E对人增生性瘢痕成纤维细胞(Fb)生长的影响及作用机制。 方法 采用实验研究方法。收集北部战区总医院2018年10月—2019年3月收治的6例增生性瘢痕患者[男1例、女5例,年龄20~51(37±8)岁]的增生性瘢痕组织,培养第3~7代人增生性瘢痕Fb用于后续实验。取细胞,分为生理盐水组、100 μmol/L刺五加皂苷E组、200 μmol/L刺五加皂苷E组和400 μmol/L刺五加皂苷E组,分别加入生理盐水,终物质的量浓度为100、200、400 μmol/L的刺五加皂苷E。取细胞,分为单纯小干扰RNA(siRNA)-阴性对照组、单纯siRNA-血小板反应蛋白1(THBS1)组、siRNA-阴性对照+400 μmol/L刺五加皂苷E组和siRNA-THBS1+400 μmol/L刺五加皂苷E组,单纯siRNA-阴性对照组和siRNA-阴性对照+400 μmol/L刺五加皂苷E组细胞转染siRNA-阴性对照,单纯siRNA-THBS1组和siRNA-THBS1+400 μmol/L刺五加皂苷E组细胞转染siRNA-THBS1,转染24 h后单纯siRNA-阴性对照组和单纯siRNA-THBS1组细胞加入生理盐水,siRNA-阴性对照+400 μmol/L刺五加皂苷E组和siRNA-THBS1+400 μmol/L刺五加皂苷E组细胞加入终物质的量浓度为400 μmol/L的刺五加皂苷E。于处理后0(即刻)、12、24、36、48 h,采用噻唑蓝法检测细胞增殖活性(以吸光度值表示)。取细胞分为生理盐水组、200 μmol/L刺五加皂苷E组、400 μmol/L刺五加皂苷E组,另取细胞分为单纯siRNA-阴性对照组、单纯siRNA-THBS1组、siRNA-阴性对照+400 μmol/L刺五加皂苷E组、siRNA-THBS1+400 μmol/L刺五加皂苷E组,相应处理同前,于处理后24 h,行Hoechst 33258染色观察细胞凋亡情况。取细胞分为生理盐水组、100 μmol/L刺五加皂苷E组、200 μmol/L刺五加皂苷E组、400 μmol/L刺五加皂苷E组,另取细胞分为单纯siRNA-阴性对照组、单纯siRNA-THBS1组、siRNA-阴性对照+400 μmol/L刺五加皂苷E组、siRNA-THBS1+400 μmol/L刺五加皂苷E组,相应处理同前,于处理后24 h,采用蛋白质印迹法检测细胞THBS1蛋白水平。以上实验每组各时间点样本数均为3。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、独立样本

    t

    检验、Bonferroni校正。 结果 处理后0 h,生理盐水组、100 μmol/L刺五加皂苷E组、200 μmol/L刺五加皂苷E组和400 μmol/L刺五加皂苷E组细胞吸光度值相近(

    P

    >0.05)。处理后12、24、36、48 h,100 μmol/L刺五加皂苷E组、200 μmol/L刺五加皂苷E组、400 μmol/L刺五加皂苷E组细胞吸光度值均明显低于生理盐水组(

    t

    =7.64、28.94、13.69、5.87,6.96、22.83、14.75、11.52,21.09、20.15、29.52、23.12,

    P

    <0.05或

    P

    <0.01)。处理后0 h,单纯siRNA-阴性对照组、单纯siRNA-THBS1组、siRNA-阴性对照+400 μmol/L刺五加皂苷E组、siRNA-THBS1+400 μmol/L刺五加皂苷E组细胞吸光度值相近(

    P

    >0.05);处理后12、24、36、48 h,单纯siRNA-THBS1组、siRNA-阴性对照+400 μmol/L刺五加皂苷E组细胞吸光度值明显低于单纯siRNA-阴性对照组(

    t

    =7.14、44.87、20.67、40.98,9.26、11.08、15.33、20.56,

    P<

    0.05或

    P<

    0.01),单纯siRNA-THBS1组、siRNA-阴性对照+400 μmol/L刺五加皂苷E组细胞吸光度值与siRNA-THBS1+400 μmol/L刺五加皂苷E组相近(

    P

    >0.05)。处理后24 h,与生理盐水组比较,200 μmol/L刺五加皂苷E组和400 μmol/L刺五加皂苷E组凋亡细胞数量增加。处理后24 h,与单纯siRNA-阴性对照组比较,单纯siRNA-THBS1组和siRNA-阴性对照+400 μmol/L刺五加皂苷E组凋亡细胞数量增加;单纯siRNA-THBS1组、siRNA-阴性对照+400 μmol/L刺五加皂苷E组和siRNA-THBS1+400 μmol/L刺五加皂苷E组凋亡细胞数量相近。处理后24 h,100 μmol/L刺五加皂苷E组、200 μmol/L刺五加皂苷E组、400 μmol/L刺五加皂苷E组细胞THBS1蛋白水平(0.87±0.12、0.38±0.07、0.20±0.09)均明显低于生理盐水组(1.83±0.17,

    t

    =16.61、16.17、17.29,

    P

    <0.01)。处理后24 h,单纯siRNA-THBS1组和siRNA-阴性对照+400 μmol/L刺五加皂苷E组细胞THBS1蛋白水平(0.61±0.07、0.58±0.07)均明显低于单纯siRNA-阴性对照组(1.86±0.07,

    t

    =71.06、83.80,

    P

    <0.01),单纯siRNA-THBS1组和siRNA-阴性对照+400 μmol/L刺五加皂苷E组细胞THBS1蛋白水平与siRNA-THBS1+400 μmol/L刺五加皂苷E组(0.63±0.11)相近(

    P

    >0.05)。 结论 刺五加皂苷E能够通过下调人增生性瘢痕Fb中THBS1蛋白表达,发挥抑制人增生性瘢痕Fb生长的作用。

     

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出版历程
  • 收稿日期:  2020-02-19
  • 网络出版日期:  2021-10-28
  • 刊出日期:  2021-03-20

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