摘要: 目的观察肠三叶因子（ITF）和黏蛋白对烧伤血清所致肠上皮细胞免疫功能变化的影响。方法（1）体外培养大鼠小肠上皮细胞株IEC-6，根据培养液添加物质不同，按照随机数字表法将细胞分为5组：①正常对照组，培养液中含10％（指体积分数，下同）小牛血清；②烧伤对照组，培养液含10％烧伤血清；③ITF＋烧伤血清组，培养液含10％烧伤血清及终浓度25ug／mLITF；④黏蛋白＋烧伤血清组，培养液含10％烧伤血清及终浓度250ug／mL黏蛋白；⑤ITF＋黏蛋白＋烧伤血清组，培养液含10％烧伤血清及终浓度25ug／mLITF、250ug／mL黏蛋白。向各组细胞加入上述培养液的同时，加入大肠杆菌菌液（1×10^8CFU／mL，200uL）。继续培养15min、30min、1h、2h、3h后，行瑞氏-吉姆萨染色，于显微镜下观察并统计黏附在细胞上的细菌数；采用锥虫蓝染色法观察并统计细胞存活率。每组每时相点样本数均为20。（2）将IEC-6细胞按照随机数字表法分为4组：烧伤对照组、ITF＋烧伤血清组、黏蛋白＋烧伤血清组、ITF＋黏蛋白＋烧伤血清组，分别同前加入相应的培养液（不加菌液）培养3、6、12、24、48h。采用放射免疫分析法测定各时相点培养上清液中TNF-a、IL-6和IL-8含量，每组每时相点样本数均为6。对实验数据行t检验。结果（1）烧伤对照组细胞各时相点细菌黏附数量较正常对照组明显增多（t值为2．947～8．149，P值均小于0．01）。与烧伤对照组比较，其余3个烧伤血清组在加菌后多数时相点细菌黏附的数量明显偏少（t值为-4．733～-2．180，P〈0．05或P〈0．01）。烧伤对照组细胞各时相点存活率与正常对照组比较均明显降低（t值为-4．126～-2．363，P值均小于0．05）。ITF＋烧伤血清组、黏蛋白＋烧伤血清组细胞存活率在部分时相点明显高于烧伤对照组（t值为2．120～3．423，P〈0．05或P〈0．01）。ITF＋黏蛋白＋烧伤血清组细胞存活率加菌后15min为（96．7±2．4）％，明显高于ITF＋烧伤血清组[（94．5±3．1）％，t=2．507，P〈0．05]；在3h时为（84．0±6．7）％，明显高于黏蛋白＋烧伤血清组[（77．1±8．2）％，t=2．934，P〈0．01]。（2）ITF＋黏蛋白＋烧伤血清组培养6、12、24、48h，TNF—a含量均低于其余3组（t值为-6．914～-2．889，P〈0．05或P〈0．01）。ITF＋黏蛋白＋烧伤血清组IL-6含量在部分时相点明显低于其余3组（t值为-7．657～-2．580，P〈0．05或P〈0．01）。ITF＋黏蛋白＋烧伤血清组在培养6、12、24、48hIL-8含量明显低于烧伤对照组和黏蛋白＋烧伤血清组（t值为-8．802～-3．640，P值均小于0．01）；在培养12、24h明显低于ITF＋烧伤血清组（t值分别为-2．786、-2．740，P值均小于0．05）。结论ITF能维护肠上皮细胞功能，抵御细菌黏附，降低细胞死亡率，同时能维护细胞免疫稳态，减少炎症介质释放；ITF与黏蛋白联用效果更明显。