摘要:
目的探讨烧伤变性脱细胞真皮基质(DADM)作为真皮替代物用于创面修复的可行性。方法(1)取12只Wistar大鼠,其中9只背部造成深Ⅱ度烫伤(以下称烧伤)创面,分别于伤后1、2、3d(每时相点3只)取创面全厚皮肤,用2.5g/L胰蛋白酶-体积分数0.5%Triton X-100行脱细胞处理制成DADM,相应称为DADM-1d、DADM-2d、DADM-3d;余下3只大鼠不致伤,同法制备ADM作为对照。对ADM和各DADM行大体、组织学观察及微生物学和生物力学检测(极限抗拉强度、最大拉力、断裂伸长率、应力-应变关系)。(2)另取64只Wistar大鼠,按随机数字表法分为ADM组、DADM.1d组、DADM-2d组、DADM-3d组,每组16只。于各大鼠背部制作-2.0cm×1.8cm大小皮瓣,将前述ADM和DADM-1d、DADM-2d、DADM-3d切制成1.8cm×1.5cm大小后分别埋植于皮瓣下。术后1、3、5、9周,每组每时相点取4只大鼠,肉眼观察创面愈合情况及埋植物的变化,并对埋植物行组织学观察。对数据行单因素方差分析及t检验。结果(1)新鲜制备的各DADM呈乳白色,质地柔软有弹性,韧性较ADM弱。光学显微镜下见ADM和各DADM中均无上皮结构和细胞存在,DADM胶原纤维增粗程度不均匀,排列紊乱,嗜伊红性增强。各DADM微生物学检测结果均为阴性。DADM-1d、DADM-2d、DADM-3d之间极限抗拉强度、最大拉力、断裂伸长率和应力-应变关系比较,差异均无统计学意义(F值为0.088-3.591,P值均大于0.05);其中DADM-3d此4项指标值最高,分别为(13.0±2.4)MPa、(61±4)N、(173±7)%、(45.7±2.0)%。ADM此4项指标各为(19.0±2.6)MPa、(95±4)N、(201±5)%、(62.5±2.2)%,与3种DADM两两比较均偏高(t值为6.42±17.125。P值均小于0.01)。(2)埋植术后1周,各组大鼠创面元渗出或红肿,埋植物未收缩或卷曲;创面有炎性细胞浸润并有Fb及毛细血管长人。术后3周时,DADM-1d、DADM-2d、ADM组埋植区毛发生长正常,DADM-3d组埋植区毛发较稀疏;各组炎性细胞减少,Fb增多,有新生小血管长人,DADM.3d组炎性细胞减退稍延迟。术后第5周,各组埋植区毛发恢复正常,埋植物收缩、变薄,表面纤维膜包裹紧密,有较大血管束长人;各组真皮基质与周围正常组织融合。术后第9周,ADM和DADM均为薄、软白色组织片,与皮瓣内面连接紧密;各组无炎性细胞浸润,胶原纤维排列规则、致密,与正常胶原组织融合。结论烧伤DADM无明显免疫原性,生物相容性好,经离体改造有望成为创面修复治疗中的真皮替代物。