摘要: 目的探讨二氯化铺（CoCL）化学缺氧对瘢痕Fli整合素连接激酶（1LK）表达的影响，以及其对细胞增殖的影响。方法体外培养7例患肯增生性瘢痕FL，取第5～6代细胞进行实验。7例患者的Fh各取6瓶，分别加入含6种终浓度为0、50、100、150、200、250txnlol／LCoCl，的DMEM培养液培养24h，采用实时荧光定量PCR法检测ILKmRNA表达。选择最适CoCl，浓度（100μmol／L）进行缺氧刺激，观察ILK蛋白于CoCI，作用0、1、2、4、12、24h的表达。将细胞分为正常对照组、阴性对照组、ILK小f扰RNA（siRNA）组，分别将con—siRNA及ILKsiRNA转染入后2组细胞，对照组仅以培养液培养，24h后弃堵养液，置于含6种浓度CoCI，的培养液中培养24h。各组各浓度4个复孑L。采剧3，3’-[1-（苯氨酰摹）-3，4-四氮唑]．二（4．甲氧基-6-硝基）苯磺酸钠（XTT）法检测各组细胞增殖水平。埘数据进行单因素方差分析以及重复测量方差分析，多重比较采用LSD法。结果100Ixmol／LCoCI，作用24h时ILKmRNA表达最高，与其他浓度CoCI，作用的Fl】相比差异有统计学意义（F=50．958，P〈0．001）。100μmol／LCoCl，作用时蛋白表达量（0．243±0．009）较0h（0．387±0．017）降低，2h（0．36l±0．010）开始增高，4h（0．584±0．028）、12h（0．730±0．029）、24h（0．785±0．031）ILK蛋白表达强度逐渐增强。其1、4、12、24h的ILK篮白表达艟与0h牛日比差异具有统计学意义（P值均小于0．05）。结果显示，正常对组在100μmol／I。CoCI2作用时细胞增殖水平最高（F=488．026，P〈0．001），从150μmol／I．起细胞增殖水平开始下降，250μmol／1．时细胞增殖水平显格低于0-μmol／[时水平（P值均小于0．05）。ILKsiRNA组细胞增殖水平在各浓度CoCI，作用下无明显变化（F=2．542，P=0.056）。ILKsiRNA纰的细胞增殖水平显著低于正常对照组及阴性对照组（F=2519．542，P〈0．001）。结论ILK可能是FIK对缺氧应答的关键蛋白，轻度缺氧可以提高细胞ILK的表达，促进搬痕FLJ增殖；而承度缺氧可以降低ILK的表达，抑制细胞增殖。