摘要: 目的 观察大鼠同种异体脂肪来源间充质干细胞(ADSC)对自体脂肪颗粒(AG)移植后早期微血管形成的影响. 方法 (1)实验1.取2只SD大鼠双侧腹股沟脂肪组织,采用胶原酶消化法、密度梯度离心法及贴壁法分离、培养、纯化ADSC.取第4代细胞行形态学观察,采用流式细胞仪检测间充质干细胞表面标志物CD34、CD49d、CD106、CD45的表达,并行成脂肪细胞、成骨细胞诱导分化鉴定,噻唑蓝法检测细胞增殖能力.(2)实验2.另取30只SD大鼠,按随机数字表法分为异体AG组6只、自体AG组8只、自体ADSC+自体AG组8只、异体ADSC+自体AG组8只.取4组大鼠一侧腹股沟脂肪组织,自体ADSC+自体AG组制备第4代ADSC,余3组脂肪弃用.取4组大鼠另一侧腹股沟脂肪组织制备自体AG.异体AG组大鼠在移植时将组内大鼠提取的0.6 g AG加入1 mL DMEM/F12培养液中混合后注射移植到另一只大鼠背部皮下,依此类推;自体AG组大鼠注射移植自体AG;自体ADSC+自体AG组大鼠用3.0 ×106个/mL自体ADSC混合液1 mL复合自体AG移植;异体ADSC+自体AG组大鼠采用实验1中2只大鼠提取的3.0×106个/mL ADSC混合液1 mL复合自体AG移植.于移植术后7d取出脂肪移植物,行大体观察、称取湿质量、病理学观察及CD31免疫组织化学染色测定阳性细胞数.对数据行单因素方差分析及SNK检验. 结果 (1)分离培养的第4代细胞形态较均一,与Fb相似;CD34和CD49d呈阳性表达,CD106和CD45呈弱阳性表达;诱导后,细胞可分化为成骨细胞和成脂肪细胞,鉴定为ADSC.第4代ADSC增殖较第10代更快.(2)移植术后7d,4组大鼠脂肪移植物未见明显感染、坏死,异体AG组和自体AG组大鼠脂肪移植物湿质量分别为(0.25±0.04)、(0.26±0.03)g,均小于自体ADSC+自体AG组的(0.36±0.03)g和异体ADSC+自体AG组的(0.35±0.04)g(P值均小于0.05).HE染色结果显示:异体AG组大鼠脂肪移植物脂肪细胞较少,有较多纤维化;自体AG组大鼠脂肪移植物脂肪细胞形态不均一,脂肪细胞周围可见纤维组织;自体ADSC+自体AG组和异体ADSC+自体AG组大鼠脂肪移植物脂肪细胞大小及形态基本一致,未见明显纤维组织.异体AG组大鼠脂肪移植物CD31阳性细胞主要分布在纤维组织,而脂肪细胞周围较少;自体AG组大鼠脂肪移植物CD31阳性细胞分布于脂肪细胞周围,阳性细胞数量远多于异体AG组;自体ADSC+自体AG组和异体ADSC+自体AG组大鼠脂肪移植物CD31阳性细胞数量较自体AG组更多,且主要分布于脂肪细胞周围.自体ADSC+自体AG组和异体ADSC+自体AG组大鼠脂肪移植物每400倍视野下CD31阳性细胞数分别为(20.5±1.1)、(22.1±1.0)个,均较异体AG组和自体AG组的(8.0±3.6)、(10.9±1.7)个多(P值均小于0.05). 结论 异体ADSC复合自体AG移植同自体ADSC复合自体AG移植一样,能够显著促进脂肪移植早期血管化。