摘要: 目的 探究皮肤黑素体的分泌和传递机制，为人黑素细胞胞吐黑素体寻找直观形态学证据。 方法 取健康青少年包皮环切术后废弃包皮，分离并培养黑素细胞(MC)及KC，倒置显微镜下观察细胞形态，免疫组织化学染色法对MC进行鉴定，免疫荧光染色法对KC进行鉴定。将MC按随机数字表法分为空白对照组、α促黑素细胞激素(α－MSH)刺激组、前列腺素E₂(PGE₂)刺激组及KC共培养组，每组4皿。空白对照组细胞用8 mL MCDB 153培养液培养；α－MSH刺激组细胞用8 mL含有100 nmol/L α－MSH的MCDB 153培养液培养；PGE₂刺激组细胞用8 mL含有200 nmol/L PGE₂的MCDB 153培养液培养；KC共培养组细胞加入2×10⁵个/mL KC，用8 mL MCDB 153培养液培养。培养第3天，原子力显微镜(AFM)下观察空白对照组以及KC共培养组MC表面形态；环境扫描电镜(ESEM)下观察4组MC表面形态，并计数细胞表面坑状结构及球形颗粒。对数据行单因素方差分析、LSD检验。 结果 (1)MC形态单一，呈长梭形，有2个或3个树突，胞体呈强反光性；KC形态均一，呈多边形、铺路石状，胞核居中，胞质内可见黑色或褐色点状物质。MC呈铁锈色，染色均一，未见其他细胞混染；KC胞质呈鲜红色荧光，胞核未染色。综上，分离培养的细胞为MC和KC。(2)AFM下可见空白对照组MC树突及胞体表面较光滑，坑状结构较少。KC共培养组MC树突表面粗糙，坑状结构较空白对照组MC树突表面明显增多；KC共培养组MC树突尾端表面坑状结构较胞体表面明显增多，坑状结构为鳞状层叠结构。(3)ESEM下可见空白对照组MC树突主干表面光滑，偶见小球状结构，随着树突向外延伸，树突尾部呈伞状展开，伞状表面分布大小较均匀的坑状凹陷。α－MSH刺激组、PGE₂刺激组、KC共培养组MC表面坑状结构数分别为(90±38)、(63±15)、(62±29)个，较空白对照组的(33±11)个明显增多(P值均小于0.05)；α－MSH刺激组MC表面坑状结构数较PGE₂刺激组、KC共培养组明显增多(P值均小于0.05)。α－MSH刺激组MC表面球形颗粒数为(80±30)个，较空白对照组的(29±8)个、PGE₂刺激组的(47±22)个、KC共培养组的(42±16)个明显增多(P值均小于0.05)。 结论 人MC表面的坑状结构与黑素体胞吐分泌作用密切相关，为证明黑素体通过胞吐作用进行分泌和传递提供了直观形态学证据。