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2017年  第33卷  第1期

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院士论坛
整合医学：烧伤医学发展的未来之路
樊代明
2017, 33(1): 1-3. doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2017.01.001
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摘要:
专家论坛
临床精细化管理的四种意识
熊利泽, 张崇斐
2017, 33(1): 4-8. doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2017.01.002
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摘要:
加强间充质干细胞在创面修复领域的转化与应用研究
胡大海, 张伟
2017, 33(1): 9-11. doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2017.01.003
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摘要:
干细胞与再生医学
不同激活剂对人富血小板血浆形成凝胶及释放活性物质影响的实验研究
杨域, 张卫, 程飚
2017, 33(1): 12-17. doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2017.01.004
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摘要:
目的 探讨葡萄糖酸钙和凝血酶对人富血小板血浆(PRP)形成富血小板凝胶(PRG)与释放生物活性物质的影响以及临床意义。 方法 2016年5—8月，笔者单位招募符合入选标准的6名健康献血志愿者，采集每名志愿者血小板制备PRP。(1)每名志愿者取10 mL PRP，按照随机数字表法分为凝血酶激活组5 mL、葡萄糖酸钙激活组5 mL，凝血酶激活组加入100 U/mL凝血酶溶液0.5 mL、葡萄糖酸钙激活组加入100 g/L葡萄糖酸钙溶液0.5 mL，于37 ℃水浴中激活1 h。记录PRG形成时间，观察激活1 h内PRG的形成情况。激活1 h，收集PRG，一部分行HE染色观察纤维蛋白分布，一部分于透射电镜下观察血小板超微结构；收集上清液，采用ELISA法检测TGF-β1、血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)、血管内皮生长因子、bFGF、EGF、胰岛素样生长因子Ⅰ的含量。(2)每名志愿者另取10 mL PRP同前分组，2次离心及2次PBS重新悬浮获得血小板悬液，同实验(1)加入相应激活剂处理1 h。采用纳米颗粒跟踪分析仪检测血小板来源不同直径微囊泡浓度及总微囊泡浓度。对数据行t检验。 结果 (1)凝血酶激活组PRG形成时间为(228±40)s，此时PRG体积最大；激活30 min PRG体积回缩至最小。葡萄糖酸钙激活组PRG形成时间为(690±71)s，此时PRG体积最大；激活55 min PRG体积回缩至最小。凝血酶激活组PRG形成时间明显短于葡萄糖酸钙激活组(t＝15.17，P<0.01)。(2)HE染色显示，激活1 h，凝血酶激活组PRG中纤维蛋白红染面积大，密集分布；葡萄糖酸钙激活组PRG中纤维蛋白红染面积小，松散分布。透射电镜显示，激活1 h，凝血酶激活组PRG中血小板均呈碎片状；葡萄糖酸钙激活组PRG中可见正在裂解的血小板、α颗粒结构及未裂解的α颗粒、致密体结构。(3)凝血酶激活组PRP释放的PDGF-BB含量为(7.4±0.8)ng/mL，明显高于葡萄糖酸钙激活组[(4.9±0.5)ng/mL，t＝5.41，P<0.01]。葡萄糖酸钙激活组PRP释放的bFGF含量为(960±151)pg/mL，明显高于凝血酶激活组[(384±56)pg/mL，t＝8.75，P<0.01]。2组PRP释放的其余4种生长因子含量相近(t值为0.11～1.97，P值均大于0.05)。(4)葡萄糖酸钙激活组血小板来源的总微囊泡、直径大于100 nm微囊泡、直径小于或等于100 nm外泌体的浓度分别为(165.8±15.1)×108/mL、(142.4±12.3)×108/mL、(23.4±2.9)×108/mL，均明显高于凝血酶激活组[分别为(24.7±4.6)×108/mL、(22.6±4.0)×108/mL、(2.1±0.7)×108/mL，t值为17.36～22.66，P值均小于0.01]。 结论 葡萄糖酸钙缓慢激活PRP，形成的PRG回缩缓慢、释放高含量的bFGF和高浓度的微囊泡，宜于修复关节腔及窦道性创面；凝血酶快速激活PRP，形成的PRG回缩较快，释放高含量的PDGF-BB和一定浓度的微囊泡，宜于修复急性创伤。
人羊膜上皮干细胞来源外泌体对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响
赵彬, 吴高峰, 张熠杰, 张伟, 杨芳芳, 肖丹, 曾凯旋, 石继红, 苏琳琳, 胡大海
2017, 33(1): 18-23. doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2017.01.005
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目的 探讨人羊膜上皮干细胞来源外泌体对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响。 方法 (1)取笔者单位妇产科5名足月分娩孕妇的羊膜组织，采用胰蛋白酶消化法分离人羊膜上皮干细胞并观察细胞形态；取第3代细胞，用罗丹明标记的鬼笔环肽染色，观察细胞骨架；另取第3代细胞，采用流式细胞仪检测细胞表面标志物CD29、CD31、CD34、CD90、CD105、SSEA3、SSEA4和免疫相关标志物人白细胞抗原DR位点(HLA－DR)的表达；另取第3代细胞，进行成脂、成骨诱导分化鉴定。(2)取第3代人羊膜上皮干细胞，用含体积分数10%无外泌体FBS的DMEM培养基培养，超速离心法从细胞培养上清液中提取人羊膜上皮干细胞来源外泌体，用扫描电镜观察其形态。(3)取6只成年SD大鼠，于每只大鼠背部制备4个面积为1 cm×1 cm的全层皮肤缺损创面，按随机数字表法将每只大鼠创面分为对照组及25、50、100 μg/mL外泌体组(每组6个创面)，分别于创面四周皮下多点均匀注射总体积100 μL的PBS及25、50、100 μg/mL人羊膜上皮干细胞来源外泌体。伤后7、14、21 d，观察创面愈合情况计算创面愈合率。伤后21 d，取各组创面愈合组织，HE染色，观察计数皮肤附件；Masson染色，观察胶原纤维排列。对数据行重复测量方差分析、随机区组方差分析、单因素方差分析及Bonferroni检验。 结果 (1)分离培养的细胞呈典型的鹅卵石样，细胞表面分布较多微绒毛；细胞CD29、CD90、SSEA3、SSEA4阳性表达率高于50.0%，CD105阳性表达率为8.0%，CD31、CD34和HLA－DR阳性表达率几乎为0；细胞经诱导后可分化为脂肪细胞和成骨细胞。综上，培养细胞鉴定为人羊膜上皮干细胞。(2)人羊膜上皮干细胞来源外泌体为直径50～150 nm的圆形或椭圆形囊泡。(3)伤后7、21 d，各组创面愈合率相近(P值均大于0.05)。伤后14 d，50、100 μg/mL外泌体组创面愈合率分别为(89.8±4.3)%、(92.0±4.6)%，均显著高于对照组的(80.3±6.4)%(P<0.05或P<0.01)；且100 μg/mL外泌体组创面愈合率显著高于25 μg/mL外泌体组[(83.3±5.1)%，P<0.05]。伤后21 d，50、100 μg/mL外泌体组创面愈合组织中皮肤附件数量分别为(4.3±1.4)、(5.1±1.6)个，明显多于对照组和25 μg/mL外泌体组的(1.4±0.5)、(1.8±0.6)个(P值均小于0.01)；且50、100 μg/mL外泌体组创面愈合组织中胶原纤维排列更整齐。 结论 人羊膜上皮干细胞来源外泌体能促进大鼠全层皮肤缺损创面的愈合。
三维生物打印微环境诱导汗腺再生的研究
姚斌, 谢江帆, 黄沙, 付小兵
2017, 33(1): 24-26. doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2017.01.006
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皮肤三维打印的研究进展
盛嘉隽, 刘功成, 李海航, 朱世辉
2017, 33(1): 27-30. doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2017.01.007
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论著
高渗钠盐溶液复苏对严重烫伤大鼠早期肝脏损伤的影响
周季平, 高智, 孙业祥, 陈旭林, 吴雪生, 王飞
2017, 33(1): 31-36. doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2017.01.008
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目的 探讨高渗钠盐溶液复苏对严重烫伤大鼠早期肝脏损伤的影响。 方法 将56只SD大鼠按随机数字表法分为假伤组8只、乳酸钠林格液组24只与高渗钠盐组24只。假伤组大鼠模拟致假伤后不予补液，另2组大鼠致背部30%TBSA深Ⅱ～Ⅲ度烫伤。按Parkland公式补液，乳酸钠林格液组大鼠补充乳酸钠林格液，高渗钠盐组大鼠补充300 mmol/L钠离子溶液。假伤组于伤后即刻，另2组于伤后2、8、24 h，分别取8只大鼠，取腹主动脉血和肝脏。干湿质量法检测肝脏含水量，全自动生化分析仪测定血清中ALT、AST含量，ELISA法检测血清TNF－α、IL－1及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)含量，紫外分光光度计检测肝脏丙二醛和SOD含量，HE染色观察肝脏病理变化。对数据行单因素方差分析和SNK检验。 结果 (1)伤后2、8、24 h，乳酸钠林格液组大鼠肝脏含水量均高于假伤组和高渗钠盐组(P<0.05或P<0.01)。(2)伤后2 h，3组大鼠血清ALT含量相近(P值均大于0.05)；伤后8、24 h，高渗钠盐组与乳酸钠林格液组大鼠血清ALT含量均高于假伤组(P<0.05或P<0.01)，高渗钠盐组大鼠血清ALT含量低于乳酸钠林格液组(P值均小于0.01)。伤后2、8、24 h，高渗钠盐组与乳酸钠林格液组大鼠血清AST含量均高于假伤组(P值均小于0.01)；伤后2、8 h，高渗钠盐组大鼠血清AST含量低于乳酸钠林格液组(P<0.05或P<0.01)。(3)伤后2、8 h，乳酸钠林格液组大鼠血清TNF－α含量分别为(123±39)、(153±38)pg/mL，高于假伤组的(60±18)pg/mL和高渗钠盐组的(85±10)、(94±16)pg/mL(P值均小于0.01)；伤后8 h，高渗钠盐组大鼠血清TNF－α含量高于假伤组(P<0.05)。伤后24 h，3组大鼠血清TNF－α的含量相近(P值均大于0.05)。伤后2、8、24 h，乳酸钠林格液组大鼠血清IL－1含量分别为(122±35)、(141±30)、(122±31)pg/mL，高渗钠盐组大鼠血清IL－1含量分别为(80±12)、(93±15)、(80±11)pg/mL，均高于假伤组的(40±17)pg/mL(P值均小于0.01)；高渗钠盐组大鼠血清IL－1含量均低于乳酸钠林格液组(P值均小于0.01)。伤后2 h，3组大鼠血清HMGB1的含量相近(P值均大于0.05)。伤后8、24 h，乳酸钠林格液组大鼠血清HMGB1含量分别为(0.386±0.146)、(0.590±0.188)ng/mL，高于假伤组的(0.050±0.027)ng/mL和高渗钠盐组的(0.143±0.038)、(0.309±0.095)ng/mL(P值均小于0.01)；伤后24 h，高渗钠盐组大鼠血清HMGB1含量高于假伤组(P<0.01)。(4)伤后2、8、24 h，乳酸钠林格液组和高渗钠盐组大鼠肝脏丙二醛含量均高于假伤组，SOD含量均低于假伤组，P值均小于0.01；高渗钠盐组大鼠肝脏丙二醛含量均低于乳酸钠林格液组，SOD含量均高于乳酸钠林格液组，P值均小于0.01。(5)与假伤组比较，乳酸钠林格液组大鼠肝细胞伤后各时相点均可见大量脂肪样变，伤后8、24 h可见肝细胞水肿空泡；高渗钠盐组大鼠仅在伤后8、24 h出现少量肝细胞脂肪样变，且未见肝细胞水肿。 结论 与乳酸钠林格液相比，高渗钠盐溶液复苏可通过减少炎症介质产生，降低氧化应激程度等减轻严重烫伤大鼠早期的肝脏损伤。
电烧伤和热力烧伤患者血清微小RNA表达谱分析
阮琼芳, 蒋梅君, 叶子青, 赵超莉, 谢卫国
2017, 33(1): 37-42. doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2017.01.009
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目的 探讨电烧伤患者、热力烧伤患者和健康人血清中微小RNA的差异表达及其意义。 方法 选择笔者单位2015年6—8月收治的符合入选标准的电烧伤患者、热力烧伤患者各3例，另选择3名健康成年志愿者，取全血分离血清并分为电烧伤组、热力烧伤组、正常对照组。Trizol法提取血清总RNA，利用微小RNA芯片技术筛选3组间差异表达(差异表达比值大于或等于2.000、小于或等于0.500)的微小RNA，对差异表达的微小RNA进行聚类和韦恩图分析，对差异表达明显的微小RNA(差异表达比值大于或等于5.000、小于或等于0.500)行京都基因和基因组百科全书(KEGG)信号通路功能富集分析。 结果 3组血清间差异表达微小RNA共220个。电烧伤组和热力烧伤组血清微小RNA表达谱与正常对照组不同。与正常对照组比较，电烧伤组血清有59个差异表达改变倍数大于2.000倍的微小RNA，其中50个表达上调，9个表达下调；热力烧伤组血清有40个差异表达改变倍数大于2.000倍的微小RNA，其中21个表达上调，19个表达下调。与热力烧伤组比较，电烧伤组血清有167个差异表达改变倍数大于2.000倍的微小RNA。与正常对照组比较，热力烧伤组血清特异表达微小RNA 17个，电烧伤组血清特异表达微小RNA 26个。KEGG信号通路功能富集分析显示，与正常对照组比较，电烧伤组血清差异表达明显的微小RNA参与胰岛素分泌信号通路、致心律失常型右心室心肌病信号通路、肥厚型心肌病信号通路、谷氨酸能突触信号通路、钙离子信号通路、环磷酸腺苷信号通路、甘油磷酸酯代谢途径、嘧啶代谢途径、血清素激活突触信号通路等；热力烧伤组血清差异表达明显的微小RNA参与肿瘤转录失调信号通路、肿瘤蛋白聚糖和肿瘤相关微小RNA信号通路、长时程增强效应信号通路、柠檬酸循环信号通路、TNF信号通路、黏着斑信号通路、内吞作用信号通路、胰岛素分泌信号通路、p53信号通路、雌激素信号通路等。 结论 电烧伤和热力烧伤血清的微小RNA表达谱与健康人血清的不同，其差异表达的微小RNA的靶基因富集的信号通路与电烧伤和热力烧伤伤后病理变化和临床表现相关。
短篇论著
负压封闭引流技术在烧伤患儿颈部及躯干创面植皮术中的应用
蔡建华, 申传安, 庹晓晔, 孙天骏, 李东杰, 邓虎平, 尚玉茹, 牛昊, 刘伟
2017, 33(1): 43-45. doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2017.01.010
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目的 探讨与传统打包加压固定比较，VSD技术在烧伤患儿颈部及躯干创面植皮术中的应用效果。 方法 回顾性分析2009年1月—2015年11月，笔者单位收治的91例颈部及躯干深度烧伤需植皮修复的患儿临床资料，根据移植皮片固定方式将患儿分为VSD组49例和传统组42例。VSD组患儿应用VSD材料固定移植皮片，传统组患儿予以缝线打包固定移植皮片。2组患儿均于术后7 d拆除敷料，常规换药至创面完全愈合。观察并记录2组患儿手术时间、植皮成活率、二次手术率、术后换药次数及术后住院日。对数据行χ2检验、独立样本t检验。 结果 VSD组患儿的手术时间为(1.5±0.5)h，明显短于传统组的(2.0±0.5)h，t＝5.310，P<0.01。VSD组患儿的植皮成活率为(97±3)%，明显高于传统组的(91±6)%，t＝5.576，P<0.01。VSD组患儿的二次手术率为2.04%(1/49)，明显低于传统组的7.14%(3/42)，χ2＝37.961，P<0.01。VSD组患儿的术后换药次数为(3.8±1.5)次，明显少于传统组的(5.8±2.4)次，t＝4.671，P<0.01。VSD组患儿的术后住院日为(10.9±2.2)d，明显短于传统组的(14.9±3.6)d，t＝6.179，P<0.01。 结论 在小儿颈部及躯干创面植皮治疗中，应用VSD固定移植皮片在缩短手术及术后住院时间、提高植皮成活率、降低二次手术率及减少换药次数等方面优于传统打包固定。
自体富血小板血浆联合负压封闭引流治疗糖尿病足溃疡的临床观察
胡建武, 任继魁, 孙晶洁, 杨红军, 安然, 蒋永仙
2017, 33(1): 46-48. doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2017.01.011
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目的 探讨自体富血小板血浆(PRP)联合VSD治疗糖尿病足溃疡(DFU)的临床疗效。 方法 根据入组治疗方式，将2010年1月—2015年5月笔者单位收治符合入选标准的46例DFU患者分为PRP＋VSD组23例和VSD组23例。VSD组患者的创面持续行VSD治疗，每10天更换1次敷料，创面达到移植皮片/皮瓣条件，行1次移植术。PRP＋VSD组患者首先行VSD治疗10 d，然后使用患者自体PRP外敷创面3 d，再行VSD治疗7 d；重复上述治疗直至创面达到移植皮片/皮瓣条件，行1次移植术。治疗期间，2组患者均行抗感染、控制血糖、改善微循环等处理。治疗2个周期，计算创面愈合率，统计治疗有效率；按照Wagner分级，记录创面愈合时间。对数据行t检验、析因设计方差分析、χ2检验。 结果 治疗2个周期，PRP＋VSD组创面愈合率为95.65%(22/23)，明显高于VSD组[47.83%(11/23), χ2＝12.970，P<0.01]。治疗2个周期，PRP＋VSD组、VSD组患者治疗有效率分别为100.00%(23/23)、86.96%(20/23)，组间比较差异无统计学意义(χ2＝1.430，P>0.05)。PRP＋VSD组患者的WagnerⅡ、Ⅲ级创面愈合时间均明显短于VSD组(处理因素主效应，F＝13.951，P<0.01)。 结论 VSD联合自体PRP治疗DFU具有协同效应，能更好促进创面愈合、缩短创面愈合时间，适宜于临床应用。
病例报告
烧伤患者右髂股动脉搭桥后感染致人造血管栓塞一例
王野, 袁家德, 冯恒超, 刘虎, 边曦
2017, 33(1): 49-50. doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2017.01.012
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烧伤合并急性淋巴细胞白血病患儿一例
张盼, 王良喜, 潘晓峰, 孙勇
2017, 33(1): 51-52. doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2017.01.013
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护理专栏
重度烧伤患者肠内营养护理规范的循证实践
杨丽, 孟宪熙, 唐寒芬, 张婷, 龚静, 王琴
2017, 33(1): 53-55. doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2017.01.014
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目的 探讨应用循证护理规范化实施肠内营养护理对重度烧伤患者营养的效果。 方法 2015年1—9月，笔者单位收治符合入选标准的35例重度烧伤患者，按其是否同意配合实施规范化肠内营养供给方案，分为循证护理组28例和常规护理组7例。循证护理组患者采用基于循证实践形成的重度烧伤患者肠内营养实践最终内容及方法建议，实施规范化肠内营养；常规护理组患者营养风险筛查方法、肠内营养开始时间和知识宣教、热量估算公式与循证护理组基本相同，但未采用序贯肠内营养方式，营养制剂采用整蛋白型肠内营养剂或自行熬制的汤水、匀浆膳等，采取间断喂养的方式经口服或管饲。测定2组患者肠内营养治疗前及治疗2、4周的体质量指数及血清白蛋白、血清前白蛋白含量，统计2组患者治疗4周内肠内营养并发症发生情况。对数据行重复测量方差分析、χ2检验、t检验。 结果 2组患者治疗前体质量指数及血清白蛋白、血清前白蛋白含量相近(t值为0.182～0.711，P值均大于0.05)。治疗2周，2组患者体质量指数相近(t＝－1.159，P>0.05)，循证护理组患者血清白蛋白、血清前白蛋白含量明显高于常规护理组(t值分别为－2.457、－8.178，P<0.05或P<0.01)。治疗4周，循证护理组患者体质量指数、血清白蛋白、血清前白蛋白含量分别为20.7±1.7、(33.2±1.8)g/L、(360±9)mg/L，明显高于常规护理组的19.3±1.8、(31.5±2.1)g/L、(308±12)mg/L(t值为－13.221～－2.054，P<0.05或P<0.01)。2组患者在治疗4周内均有4例发生并发症，发生比例差异有统计学意义(χ2＝－2.569，P<0.001)，以胃肠道并发症为常见。 结论 应用循证护理规范化实施肠内营养护理，可改善重度烧伤患者各项营养指标，减少肠内营养并发症的发生。
十例昆山粉尘爆炸事故患者的应急救护经验
冯苹, 张伟英, 张玲, 孙颖, 张玲娟
2017, 33(1): 56-57. doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2017.01.015
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综述
手烧伤瘢痕挛缩的预防和治疗研究进展
王康安, 伍国胜, 孙瑜, 夏照帆
2017, 33(1): 58-61. doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2017.01.016
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摘要:
烧伤疼痛研究进展
杨成兰, 魏在荣
2017, 33(1): 61-64. doi: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2017.01.017
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