摘要:
目的了解外源性热休克因子1(HSF1)对烧伤血清刺激的巨噬细胞中相关炎性介质基因表达的影响。方法制备严重烧伤和正常大鼠血清;构建pcDNA3.1/HSF1重组载体。将培养的RAW264.7巨噬细胞株转染(具体分为:未转染、转染空载体、转染重组载体)后再分别使用前述2种血清刺激。另取部分未行血清刺激的转染重组载体的巨噬细胞,用蛋白质印迹法检测其HSF1蛋白表达水平;反转录-PCR法检测经血清刺激的细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和白细胞介素10(IL-10)基因表达水平。结果已转染重组载体的细胞株较稳定,检出有HSF1部分活化。反转录-PCR检测到,未转染的正常血清刺激的巨噬细胞中TNF—α、HMGB1、IL-10的基因仅有少量表达,而烧伤血清刺激能明显上调其基因表达(分别为0.910±0.100、0.860±0.020、0.430±0.010);与转染空载体+烧伤血清组(上述3项指标分别为0.800±0.050、0.880±0.030、0.420±0.010)比较,转染重组载体+烧伤血清组可明显抑制巨噬细胞中TNF—α和HMGB1的基因表达并上调IL-10的基因表达(分别为0.130±0.100、0.450±0.020、0.450±0.020)。结论严重烧伤后给予HSF1可以抑制巨噬细胞产生的某些促炎介质的表达,适当上调某些抗炎介质的表达,对机体发挥保护作用。