摘要:
目的了解结缔组织生长因子(CTGF)介导TGF-β1发挥促人增生性瘢痕Fb(HSFb)转分化的作用。方法体外培养人HSFb,取5份细胞标本分别加入不同浓度TGF-β1(0、2.5、5.0、7.5、10.0ng/mL),作用48h后待测。余下标本分为:空白对照组;CTGF刺激组,培养液中加入终浓度10.0ng/mL重组人CTGF;TGF-β1刺激组,培养液中加入终浓度10.0ng/mL重组人TGF-β1;CTGF反义寡脱氧核苷酸(ASODN)转染组,细胞转染CTGF ASODN后,加入培养液;CTGF ASODN转染+TGF-β1刺激组,细胞转染CTGF ASODN后2h,加入含终浓度10.0ng/mL重组人TGF-β1的培养液。蛋白质印迹法分析不同浓度TGF-β1刺激对细胞CTGF表达的影响,比较各组α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达变化;流式细胞仪检测α-SMA阳性细胞百分率。结果TGF-β1浓度为10.0ng/mL时,CTGF的表达明显高于未受刺激的细胞(P〈0.05)。CTGF刺激组与TGF-β1刺激组α-SMA表达明显高于空白对照组(P〈0.01)。CTGFASODN转染组以及CTGFASODN转染+TGF-β1刺激组α-SMA表达与空白对照组接近(P〉0.05)。上述各组细胞α-SMA阳性细胞百分率依次为(10.8±2.8)%、(29.1±4.0)%、(28.7±4.8)%、(10.7±2.3)%、(14.3±2.9)%,统计学分析结果类似于α-SMA表达。结论CTGF是TGF-β1发挥促人HSFb转分化的重要下游效应分子之一。