中华烧伤与创面修复杂志

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王达利

2023, 39(2): 101-105. doi: 10.3760/cma.j.cn501225-20230112-00014

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摘要:
自研究者们发现间充质干细胞条件培养基、外泌体具有与间充质干细胞等效的生物学效应时，间充质干细胞旁分泌效应的代表产物：间充质干细胞外泌体就成为间充质干细胞“无细胞”治疗的研究热点。但是，目前多数研究者采用传统培养条件培养间充质干细胞，分离外泌体用于治疗创面或者其他疾病。从理论上讲，间充质干细胞的旁分泌效应与创面（疾病）微环境的病理状况或者体外培养条件直接相关，其旁分泌的组分与生物学效应也会随着创面（疾病）微环境或体外培养条件的改变而发生改变。因此，不考虑拟治疗疾病的实际情况，仅仅采用传统培养条件培养间充质干细胞提取外泌体，治疗不同疾病的研究方案是否可行值得商榷。由此，笔者认为间充质干细胞外泌体的研究，应尽可能考虑拟治疗创面（疾病）微环境因素，否则提取的间充质干细胞外泌体可能不“精准”，或者说难以真正达到间充质干细胞的治疗效果。该文总结了笔者对目前间充质干细胞外泌体与创面微环境研究的相关思考与问题，希望与研究者共同商讨。

巨噬细胞在创面愈合中的调节作用及其相关机制

贺伟峰, 闫凌峰

2023, 39(2): 106-113. doi: 10.3760/cma.j.cn501225-20230110-00010

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摘要:
创面愈合是一个被精准调控的复杂过程，包含了炎症、抗炎、再生等多个阶段。由于巨噬细胞具有明显的可塑性，可以在具有差异化的创面愈合过程中发挥重要的调节作用。巨噬细胞若未能适时表达特定功能，将会影响组织的愈合功能并导致组织病理性愈合。因此，了解巨噬细胞在创面愈合的不同阶段发挥的不同功能并进行针对性调控，对促进创伤组织的愈合再生有重要意义。该文根据创面愈合的基本过程，阐述了创面内不同类型巨噬细胞发挥的不同功能及其基本机制，并强调了未来可能应用于临床治疗的巨噬细胞调控策略。

人脐带间充质干细胞联合自体Meek微型皮片移植在大面积烧伤患者中应用的前瞻性研究

闫甜甜, 肖荣, 王影, 林国安, 郑银, 赵辉, 李文军, 尚新志, 孟进松, 胡东升, 李嵩, 王超, 林之琛, 陈鸿昌, 赵东彦, 唐棣

2023, 39(2): 114-121. doi: 10.3760/cma.j.cn501225-20220728-00319

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摘要:
目的探讨人脐带间充质干细胞（hUCMSC）联合自体Meek微型皮片移植对大面积烧伤患者的效果。方法采用前瞻性自身对照研究方法。2019年5月—2022年6月，解放军联勤保障部队第九九〇医院收治的16例大面积烧伤患者符合入选标准，按照剔除标准剔除3例患者，最终纳入13例患者，其中男10例、女3例，年龄24~61（42±13）岁。共选择受试区20个（创面40个，大小均为10 cm×10 cm）。采用随机数字表法将每个受试区中的2个相邻创面分为涂抹含hUCMSC透明质酸凝胶的hUCMSC+凝胶组及涂抹单纯透明质酸凝胶的单纯凝胶组，每组20个创面，随后2组创面均移植扩展比例为1∶6的自体Meek微型皮片。术后2、3、4周，观察创面愈合情况并计算创面愈合率，记录创面愈合时间。术后，若创面出现脓性分泌物，则采集创面分泌物标本行微生物培养。术后3、6、12个月，采用温哥华瘢痕量表评估创面瘢痕增生情况。术后3个月，取创面组织，行苏木精-伊红（HE）染色观察皮肤组织形态学变化，行免疫组织化学染色观察Ki67阳性和波形蛋白阳性表达情况并统计阳性细胞数。对数据行配对样本t检验及Bonferroni校正。结果术后2、3、4周，hUCMSC+凝胶组创面愈合率分别为（80±11）%、（84±12）%、（92±9）%，均明显高于单纯凝胶组的（67±18）%、（74±21）%、（84±16）%（t值分别为4.01、3.52、3.66，P<0.05）。hUCMSC+凝胶组创面愈合时间为（31±11）d，较单纯凝胶组的（36±13）d明显缩短（t=-3.68，P<0.05）。术后，相邻的2组创面分泌物标本微生物培养情况均相同，4个受试区结果为阴性，16个受试区结果为阳性。术后3、6、12个月，单纯凝胶组创面温哥华瘢痕量表评分分别为（7.8±1.9）、（6.7±2.1）、（5.4±1.6）分，均明显高于hUCMSC+凝胶组的（6.8±1.8）、（5.6±1.6）、（4.0±1.4）分（t值分别为-4.79、-4.37、-5.47，P<0.05）。术后3个月，HE染色显示，hUCMSC+凝胶组创面表皮层厚度、表皮嵴等较单纯凝胶组增加；免疫组织化学染色显示，hUCMSC+凝胶组创面Ki67阳性细胞数较单纯凝胶组明显增加（t=4.39，P<0.05），2组创面波形蛋白阳性细胞数无明显差异（P>0.05）。结论将含hUCMSC的透明质酸凝胶涂抹于创面的应用方式操作方便，是一种较佳的给药途径。hUCMSC外用可促进大面积烧伤患者自体Meek微型皮片移植术区愈合，缩短创面愈合时间，减轻瘢痕增生，可能与创面表皮层厚度、表皮嵴增加和细胞增殖活跃有关。

肿瘤坏死因子α/胞外信号调节激酶途径对HaCaT细胞迁移能力及小鼠全层皮肤缺损的影响

赵诗涵, 金琳博, 张江河, 张一鸣, 樊东力

2023, 39(2): 122-131. doi: 10.3760/cma.j.cn501225-20221019-00460

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摘要:
目的探讨肿瘤坏死因子α（TNF-α）/胞外信号调节激酶（ERK）途径对HaCaT细胞迁移能力及小鼠全层皮肤缺损的影响。方法采用实验研究方法。按照随机数字表法（下同）将HaCaT细胞分为常氧组和低氧（氧气体积分数为1%，下同）条件下培养的低氧组。培养24 h后，采用微阵列置信度分析软件SAM 4.01筛选出2组细胞的显著差异表达基因，通过京都基因和基因组百科全书对信号通路中每条基因数目的显著性进行分析以筛选差异显著的信号通路，样本数为3。另取HaCaT细胞，在低氧条件下培养0（即刻）、3、6、12、24 h，采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测细胞分泌TNF-α的水平，样本数为5。另取HaCaT细胞，分为常氧组、单纯低氧组和加入FR180204（一种ERK抑制剂）并置于低氧条件下培养的低氧+抑制剂组，培养3、6、12、24 h，采用划痕试验检测细胞的迁移能力，样本数为12。另取HaCaT细胞，在低氧条件下培养0、3、6、12、24 h，采用蛋白质印迹法检测细胞中磷酸化核因子κB（p-NF-κB）、磷酸化p38（p-p38）、磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）、神经钙黏素和上皮钙黏素的表达，样本数为3。取64只6~8周龄雄性BALB/c小鼠，在小鼠背部制作全层皮肤缺损创面模型后，将其分为空白对照组和用FR180204处理的抑制剂组，每组32只，分别作相应处理。伤后0、3、6、9、12、15 d，观察创面情况并计算其愈合率（样本数为8）。伤后1、3、6、15 d，采用苏木精-伊红染色观察创面中新生血管生成、炎症细胞浸润和表皮新生情况，采用Masson染色观察创面中胶原沉积情况，采用蛋白质印迹法检测创面组织中p-NF-κB、p-p38、p-ERK1/2、神经钙黏素和上皮钙黏素的表达（样本数为6），采用免疫组织化学法检测创面中Ki67阳性细胞数和血管内皮生长因子（VEGF）吸光度值（样本数为5），采用ELISA法检测创面组织中白细胞介素6（IL-6）、IL-10、IL-1β和CCL20的蛋白表达（样本数为6）。对数据行单因素方差分析、重复测量方差分析、析因设计方差分析、Tukey检验、LSD检验和独立样本t检验。结果培养24 h后，与常氧组相比，低氧组细胞中上调了7 667个基因，下调了7 174个基因；在前述差异表达基因中，TNF-α信号通路有显著的变化（P<0.05）且基因数目多。低氧条件下，与0 h的（1.9±0.3）pg/mL相比，TNF-α表达量仅在细胞培养24 h［（11.1±2.1）pg/mL］时显著增加（P<0.05）。与常氧组相比，单纯低氧组细胞培养6、12、24 h的迁移能力均明显增强（t值分别为2.27、4.65、4.67，P<0.05）；与单纯低氧组相比，低氧+抑制剂组细胞培养3、6、12、24 h的迁移能力均明显减弱（t值分别为2.43、3.06、4.62、8.14，P<0.05）。低氧条件下，与培养0 h相比，p-NF-κB、p-ERK1/2、神经钙黏素表达量在细胞培养12、24 h时均明显升高（P<0.05），p-p38表达量在细胞培养3、6、12、24 h时均明显升高（P<0.05），上皮钙黏素表达量在细胞培养6、12、24 h时均明显降低（P<0.05）；其中，p-ERK1/2、p-NF-κB和上皮钙黏素在细胞中的表达量呈时间依赖性。与空白对照组相比，抑制剂组小鼠伤后3、6、9、12、15 d创面愈合率均明显降低（P<0.05）；抑制剂组小鼠创缘周围在伤后3、6、15 d有更多炎症细胞浸润，尤其在伤后15 d，创面中可见大量组织坏死且新生表皮层不连续，同时胶原合成和新生血管减少；抑制剂组小鼠创面中p-NF-κB表达量在伤后3、6 d均明显降低（t值分别为3.26、4.26，P<0.05）但在伤后15 d明显升高（t=3.25，P<0.05），p-p38和神经钙黏素表达量在伤后1、3、6 d均明显降低（t值分别为4.89、2.98、3.98，9.51、11.69、4.10，P<0.05），p-ERK1/2表达量在伤后1、3、6、15 d均明显降低（t值分别为26.69、3.63、5.12、5.14，P<0.05），上皮钙黏素表达量在伤后1 d明显降低（t=20.67，P<0.05）但在伤后6 d明显增加（t=2.90，P<0.05）；抑制剂组小鼠创面中Ki67阳性细胞数和VEGF的吸光度值在伤后3、6、15 d均明显减少/降低（t值分别为4.20、7.35、3.34，4.14、3.20、3.73，P<0.05）；抑制剂组小鼠创面组织中IL-10表达量在伤后6 d明显降低（t=2.92，P<0.05），IL-6表达量在伤后6 d明显增加（t=2.73，P<0.05），IL-1β表达量在伤后15 d显著增加（t=3.46，P<0.05），CCL20表达量在伤后1、6 d均明显降低（t值分别为3.96、2.63，P<0.05）但在伤后15 d显著增加（t=3.68，P<0.05）。结论 TNF-α/ERK途径可促进HaCaT细胞迁移并通过影响小鼠全层皮肤缺损创面中炎症因子和趋化因子的表达调控创面愈合。

自体脂肪干细胞基质胶对兔耳全层皮肤缺损创面愈合及瘢痕增生的影响

李梁, 白南, 付妍婕, 吴灿, 张玉姣, 陈远征

2023, 39(2): 132-140. doi: 10.3760/cma.j.cn501225-20221020-00463

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摘要:
目的探讨自体脂肪干细胞基质胶对兔耳全层皮肤缺损创面愈合及瘢痕增生的影响，并分析其相关机制。方法采用实验研究方法。切取42只2~3个月龄雄性新西兰大白兔背部完整脂肪垫，制备脂肪干细胞基质胶，并于每只兔双耳腹侧制备全层皮肤缺损创面，将左耳创面纳入脂肪干细胞基质胶组（以下简称基质胶组）、右耳创面纳入磷酸盐缓冲液（PBS）组，分别注入自体脂肪干细胞基质胶和PBS。计算伤后7、14、21 d创面愈合率，并于创面愈合后1、2、3、4个月行创面形成瘢痕组织（以下简称瘢痕组织）温哥华瘢痕量表（VSS）评分；行苏木精-伊红染色观测伤后7、14、21 d创面组织病理学改变和创面愈合后1、2、3、4个月瘢痕组织真皮厚度；行Masson染色观察伤后7、14、21 d创面组织和创面愈合后1、2、3、4个月瘢痕组织中胶原排布，并计算胶原容积分数（CVF）；采用免疫组织化学法观测伤后7、14、21 d创面组织中微血管计数（MVC）与创面愈合后1、2、3、4个月瘢痕组织中转化生长因子-β₁（TGF-β₁）和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达，并行基质胶组瘢痕组织中α-SMA与TGF-β₁表达相关性分析；采用酶联免疫吸附测定法检测伤后7、14、21 d创面组织中血管内皮生长因子（VEGF）和表皮生长因子（EGF）的表达。各组各时间点样本数均为6。对数据行重复测量方差分析、析因设计方差分析、配对样本t检验、LSD检验与Pearson相关性分析。结果伤后7 d，基质胶组创面愈合率为（10.3±1.7）%，与PBS组的（8.5±2.1）%接近（P>0.05）；伤后14、21 d，基质胶组创面愈合率分别为（75.5±7.0）%、（98.7±0.8）%，均明显高于PBS组的（52.7±6.7）%、（90.5±1.7）%（t值分别为5.79、10.37，P<0.05）。创面愈合后1、2、3、4个月，基质胶组瘢痕组织VSS评分均明显低于PBS组（t值分别为-5.00、-2.86、-3.31、-4.45，P<0.05）。与组内前一时间点比较，除基质胶组创面愈合后4个月（P>0.05）外，2组创面愈合后各时间点瘢痕组织VSS评分均明显升高（P<0.05）。伤后7 d，2组创面肉芽组织再生与上皮化程度接近；伤后14、21 d，基质胶组创面组织中成纤维细胞、毛细血管、上皮细胞层数明显多于PBS组。创面愈合后1、2、3、4个月，基质胶组瘢痕组织真皮厚度均明显薄于PBS组（t值分别为-4.08、-5.52、-6.18、-6.30，P<0.05）。与组内前一时间点比较，2组创面愈合后各时间点瘢痕组织真皮厚度均明显增厚（P<0.05）。与PBS组比较，基质胶组伤后14、21 d创面组织中胶原排布更规则且CVF均明显升高（t值分别为3.98、3.19，P<0.05），创面愈合后1、2、3、4个月瘢痕组织中胶原排布也更规则但CVF均明显降低（t值分别为-7.38、-4.20、-4.10、-4.65，P<0.05）。与组内前一时间点比较，除基质胶组创面愈合后1个月（P>0.05）外，2组创面伤后各时间点创面组织与创面愈合后各时间点瘢痕组织中CVF均明显升高（P<0.05）。伤后14、21 d，基质胶组创面组织中MVC均明显高于PBS组（t值分别为4.33、10.10，P<0.05）。与组内前一时间点比较，除PBS组伤后21 d（P>0.05）外，2组创面伤后各时间点MVC均明显升高（P<0.05）。创面愈合后1、2、3、4个月，基质胶组瘢痕组织中TGF-β₁和α-SMA的表达均明显低于PBS组（t值分别为-2.83、-5.46、-5.61、-8.63，-10.11、-5.79、-8.08、-11.96，P<0.05）。与组内前一时间点比较，除基质胶组创面愈合后4个月α-SMA表达（P>0.05）外，2组创面愈合后各时间点瘢痕组织中TGF-β₁与α-SMA表达均明显升高（P<0.05）。基质胶组瘢痕组织中α-SMA与TGF-β₁表达之间呈显著正相关（r=0.92，P<0.05）。伤后14、21 d，基质胶组创面组织中VEGF（t值分别为6.14、6.75，P<0.05）和EGF（t值分别为8.17、5.85，P<0.05）的表达均明显高于PBS组。与组内前一时间点比较，2组创面伤后各时间点VEGF表达均明显增高（P<0.05），EGF表达均明显下降（P<0.05）。结论脂肪干细胞基质胶可能通过促进创面组织中胶原沉积和VEGF、EGF的表达从而显著促进兔耳全层皮肤缺损创面愈合，还可能通过抑制瘢痕组织中胶原沉积和TGF-β₁、α-SMA的表达进一步抑制创面愈合后瘢痕增生。

改良CT血管造影术辅助基于浅筋膜穿支的股前外侧皮瓣穿支评估与偏心设计的前瞻性研究

张月恒, 崔文举, 宋坤修, 孙乐刚, 王芳, 刘小智, 邓志洋, 张志强, 刘永涛

2023, 39(2): 141-149. doi: 10.3760/cma.j.cn501225-20220902-00376

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摘要:
目的通过改良CT血管造影（CTA）术，探讨基于浅筋膜穿支的股前外侧皮瓣术前全程穿支评估与术中偏心设计，并观察其临床效果。方法采用前瞻性观察性研究方法。2021年1月—2022年7月，滨州医学院附属医院手（显微）外科和口腔颌面外科共收治符合入选标准的12例口腔颌面部肿瘤患者及10例上肢开放性损伤伴大面积软组织缺损患者，其中男12例、女10例；年龄33~75岁，平均56.6岁。口腔颌面部肿瘤患者均在同期行肿瘤扩大切除+根治性颈部淋巴结清扫术后采用股前外侧皮瓣重建口腔或颌面；上肢软组织缺损患者在Ⅰ期行彻底清创后，于Ⅱ期采用股前外侧皮瓣修复创面。清创后创面面积为3.5 cm×3.5 cm~25.0 cm×10.0 cm，所需皮瓣面积为4.0 cm×4.0 cm~23.0 cm×13.0 cm。术前对股前外侧皮瓣供区行改良CTA检查，改良CTA的参数设置主要为降低管电压和管电流，增加造影剂剂量及双时相扫描。将获取的图像数据上传至GE AW 4.7工作站，采用容积再现功能进行可视化重建并对全程穿支评估。术前根据前述评估进行穿支及其源动脉信息的体表标记，术中根据所需皮瓣面积及形状设计和切取以可见的浅筋膜穿支为中心的偏心皮瓣。对皮瓣供区创面行直接缝合或全厚皮片移植修复。对比改良CTA检查与传统CTA检查的总辐射剂量。统计改良CTA下双侧皮瓣供区的穿支穿出点分布及浅筋膜穿支长度、走行。将术前观测的目标穿支类型、数目、来源，穿支穿出点分布及其源动脉管径、走行、分支情况与术中进行对比。观测术后供区创面愈合、受区皮瓣成活情况。随访皮瓣质地、外观，口腔及上肢功能，股部供区功能。结果改良CTA检查的总辐射剂量小于传统CTA检查。共观察到双侧供区穿支48支，其中31支（64.6%）向外下方走行、9支（18.8%）内下方走行、6支（12.5%）外上方走行、2支（4.2%）内上方走行，浅筋膜穿支平均长度为19.94 mm。术前观测到的目标穿支来源及其源动脉管径、走行、分支与术中探查到的基本一致；术前观察到肌间隙型（含肌皮-肌间隙）穿支15支、肌皮型穿支10支，与术中探查一致；术前体表穿支穿出点标记与术中实际穿支穿出点距离为（0.38±0.11）mm。术后皮瓣均成活，无血管危象发生；5例患者植皮供区创面及17例患者直接拉拢缝合供区创面均愈合良好。术后随访2个月~1年，平均8.2个月，皮瓣质地柔软、轻度臃肿；口腔颌面部肿瘤患者的饮食、闭开口活动无障碍，舌癌患者的言语功能轻度障碍但能完成基本的语言交流，上肢软组织损伤患者腕及肘关节、前臂旋转功能无明显受限；股部供区无明显紧绷感，髋、膝关节活动无受限。结论对股前外侧皮瓣供区行改良CTA可视化重建，能够评估全程穿支，尤其是浅筋膜穿支，将该皮瓣用于重建口腔或颌面及修复上肢皮肤软组织缺损可取得良好效果。术前明确穿支类型、数目、来源以及穿支穿出点分布及其源动脉的管径、走行、分支，实现了以浅筋膜穿支整体为中心的股前外侧皮瓣偏心设计，有较强的指导价值。

定向皮肤软组织扩张器在腹部瘢痕整复中扩张规律的前瞻性研究

薛继东, 梁琰, 邢培朋, 狄海萍, 张建, 杨高远, 夏成德

2023, 39(2): 150-157. doi: 10.3760/cma.j.cn501120-20211123-00392

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目的观察定向皮肤软组织扩张器（以下简称扩张器）在腹部瘢痕整复中的扩张规律。方法采用前瞻性自身对照研究方法。采用随机数字表法选择2018年1月—2020年12月郑州市第一人民医院收治的20例符合入选标准的腹部瘢痕患者，其中男5例、女15例，年龄12~51（31±12）岁，Ⅰ型瘢痕患者12例、Ⅱ型瘢痕患者8例。Ⅰ期在瘢痕两侧置入额定容量为300~600 mL的扩张器2或3枚，其中至少1枚额定容量为500 mL（作为后续观察对象）。拆线后开始注水治疗，扩张时间为4~6个月，注水量达扩张器额定容量2.0倍后，Ⅱ期行腹部瘢痕切除+扩张器取出+局部扩张皮瓣转移修复。分别测定注水量达扩张器额定容量1.0、1.2、1.5、1.8、2.0倍时扩张处的皮肤表面积，并计算扩张相应倍数（1.0、1.2、1.5、1.8、2.0倍）和相邻倍数区间（1.0~1.2、1.2~1.5、1.5~1.8、1.8~2.0倍）时扩张处的皮肤扩张率；测定术后0（即刻）、1、2、3、4、5、6个月时修复处的皮肤表面积，并计算术后不同时间点（术后1、2、3、4、5、6个月）和术后不同时间段（术后0~1、1~2、2~3、3~4、4~5、5~6个月）修复处的皮肤回缩率。对数据行重复测量方差分析、LSD-t检验。结果与扩张1.0倍［（287.6±2.2）cm²、（47.0±0.7）%］比较，扩张1.2、1.5、1.8、2.0倍时患者扩张处的皮肤表面积和扩张率［（315.8±2.1）、（356.1±2.8）、（384.9±1.6）、（386.2±1.5）cm²，（51.7±0.6）%、（57.2±0.6）%、（60.4±0.6）%、（60.5±0.6）%］均明显增加（t值分别为46.04、90.38、150.14、159.55，45.11、87.83、135.82、118.48，P<0.05）；与扩张1.2倍比较，扩张1.5、1.8、2.0倍时患者扩张处的皮肤表面积和扩张率均明显增加（t值分别为49.82、109.64、122.14，144.19、49.51、105.85，P<0.05）；与扩张1.5倍比较，扩张1.8倍（t值分别为38.93、39.22，P<0.05）、2.0倍（t值分别为38.37、38.78，P<0.05）时患者扩张处的皮肤表面积和扩张率均明显增加；与扩张1.8倍比较，扩张2.0倍时患者扩张处的皮肤表面积和扩张率差异均无统计学意义（t值分别为4.71、4.72，P>0.05）。与扩张1.0~1.2倍比较，扩张1.2~1.5倍时患者扩张处的皮肤扩张率明显增加（t=6.95，P<0.05），扩张1.5~1.8、1.8~2.0倍时患者扩张处的皮肤扩张率均明显降低（t值分别为5.89、40.75，P<0.05）；与扩张1.2~1.5倍比较，扩张1.5~1.8、1.8~2.0倍时患者扩张处的皮肤扩张率均明显降低（t值分别为10.50、41.92，P<0.05）；与扩张1.5~1.8倍比较，扩张1.8~2.0倍时患者扩张处的皮肤扩张率明显降低（t=32.60，P<0.05）。与术后0个月比较，术后1、2、3、4、5、6个月患者修复处的皮肤表面积均明显减少（t值分别为61.66、82.70、96.44、102.81、104.51、102.21，P<0.05）；与术后1个月比较，术后2、3、4、5、6个月患者修复处的皮肤表面积均明显减少（t值分别为37.37、64.64、69.40、72.46、72.62，P<0.05）、回缩率均明显增加（t值分别为32.29、50.00、52.67、54.76、54.62，P<0.05）；与术后2个月比较，术后3、4、5、6个月患者修复处的皮肤表面积均明显减少（t值分别为52.41、60.41、70.30、65.32，P<0.05）、回缩率均明显增加（t值分别为52.97、59.29、69.68、64.50，P<0.05）；与术后3个月比较，术后4、5、6个月患者修复处的皮肤表面积均明显减少（t值分别为5.53、38.00、38.52，P<0.05）、回缩率均明显增加（t值分别为25.36、38.59、37.47，P<0.05）；与术后4个月比较，术后5、6个月患者修复处的皮肤表面积（t值分别为41.10、50.50，P>0.05）和回缩率（t值分别为48.09、50.00，P>0.05）差异均无统计学意义；与术后5个月比较，术后6个月患者修复处的皮肤表面积和回缩率差异均无统计学意义（t值分别为9.40、9.59，P>0.05）。与术后0~1个月比较，术后1~2、2~3、3~4、4~5、5~6个月患者修复处的皮肤回缩率均明显降低（t值分别为13.56、40.00、49.21、53.97、57.68，P<0.05）；与术后1~2个月比较，术后2~3、3~4、4~5、5~6个月患者修复处的皮肤回缩率均明显降低（t值分别为12.37、27.72、30.16、31.67，P<0.05）；与术后2~3个月比较，术后3~4、4~5、5~6个月患者修复处的皮肤回缩率均明显降低（t值分别为33.73、41.31、54.10，P<0.05）；与术后3~4个月比较，术后4~5、5~6个月患者修复处的皮肤回缩率差异均无统计学意义（t值分别为10.90、23.60，P>0.05）；与术后4~5个月比较，术后5~6个月患者修复处的皮肤回缩率差异无统计学意义（t=20.90，P>0.05）。结论扩张器能有效扩张腹部皮肤，从而修复腹部瘢痕畸形，注水扩张达扩张器额定容量1.8倍后维持扩张1个月，可以作为Ⅱ期手术时间节点。

基于照片建模技术的病理性瘢痕三维形态量化评估软件的研发及应用验证的前瞻性研究

姜伟乾, 潘锋, 柴密, 乌兰哈斯, 于雪冬, 郭伶俐

2023, 39(2): 158-164. doi: 10.3760/cma.j.cn501225-20220513-00184

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摘要:
目的开发一款基于照片建模技术的病理性瘢痕三维形态量化评估软件，并验证其在临床应用中的准确性和可行性。方法采用前瞻性观察性研究方法。解放军总医院第一医学中心2019年4月—2022年1月收治59例符合入选标准的病理性瘢痕患者（共107处瘢痕），其中男27例、女32例，年龄33（26，44）岁。以照片建模技术为基础，自主研发具有患者基本信息采集及瘢痕拍照、三维重建、模型浏览、报告生成等功能的病理性瘢痕三维形态测量软件。采用软件和临床常规方法（游标卡尺、彩色多普勒超声诊断仪及弹性体印模注水法测量）分别测量瘢痕的最长径、最大厚度及体积。统计建模成功瘢痕的数量、分布、患者数及使用软件和临床常规方法测量的瘢痕最长径、最大厚度、体积，统计建模失败瘢痕的数量、分布、类型及患者数。采用一元线性回归分析及Bland-Altman法分别分析软件和临床常规方法测量瘢痕最长径、最大厚度、体积的相关性和一致性，分别计算组内相关系数（ICC）、平均绝对误差、平均绝对百分误差。结果对54例患者的102处瘢痕成功建模，瘢痕位于胸部43处、肩背部27处、四肢12处、面颈部9处、耳廓6处、腹部5处。使用软件和临床常规方法测量的瘢痕最长径、最大厚度、体积分别为3.61（2.13，5.19）、3.53（2.02，5.11）cm，0.45（0.28，0.70）、0.43（0.24，0.72）cm，1.17（0.43，3.57）、0.96（0.36，3.26）mL。5例患者5处增生性瘢痕或耳廓瘢痕疙瘩建模失败。使用软件和临床常规方法测量的瘢痕最长径、最大厚度、体积均呈显著线性相关（r值分别为0.985、0.917、0.998，P<0.05）。使用软件和临床常规方法测量的瘢痕最长径、最大厚度、体积ICC分别为0.993、0.958、0.999（95%置信区间分别为0.989~0.995、0.938~0.971、0.998~0.999）。软件和临床常规方法测量的瘢痕最长径、最大厚度、体积一致性较好。Bland-Altman法分析显示，分别有3.92%（4/102）、7.84%（8/102）、8.82%（9/102）的瘢痕最长径、最大厚度、体积在95%一致性界限以外；在95%一致性界限以内，2.04%（2/98）的瘢痕最长径误差在0.5 cm以上，1.06%（1/94）的瘢痕最大厚度误差在0.2 cm以上，2.15%（2/93）的瘢痕体积误差在0.5 mL以上。软件与临床常规方法测量的瘢痕最长径、最大厚度、体积的平均绝对误差分别为0.21 cm、0.10 cm、0.24 mL，平均绝对百分误差分别为5.75%、21.21%、24.80%。结论基于照片建模技术的病理性瘢痕三维形态量化评估软件可以实现对大部分瘢痕的三维建模和形态参数测量。该软件测量结果与临床常规方法测量结果具有较好的一致性，误差在临床可接受范围内，能够作为病理性瘢痕临床诊断与治疗的辅助方法。

三维生物打印抗菌型水凝胶对大鼠全层皮肤缺损创面的作用

金荣华, 张珍珍, 徐鹏钦, 夏斯展, 翁婷婷, 朱志康, 王新刚, 有传刚, 韩春茂

2023, 39(2): 165-174. doi: 10.3760/cma.j.cn501120-20210809-00274

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摘要:
目的探讨三维生物打印负载纳米银的甲基丙烯酸酐化明胶（GelMA）水凝胶对大鼠全层皮肤缺损创面的作用。方法采用实验研究方法。采用扫描电子显微镜观察不同质量浓度的纳米银溶液中的纳米银颗粒的形态、粒径、分布和含不同终质量分数GelMA的含银GelMA水凝胶的孔隙结构，并计算孔径大小。处理1、3、7、14 d，采用质谱仪检测含终质量分数15% GelMA和终质量浓度10 mg/L纳米银的水凝胶的纳米银释放浓度。培养24 h，检测含终质量浓度0（无纳米银）、25、50、100 mg/L纳米银的GelMA水凝胶对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的抑菌圈直径。取浙江大学医学院附属第二医院泌尿外科2020年7月收治的1名健康5岁男童包皮环切术后废弃包皮和该院整形外科2020年7月收治的1名健康23岁女性抽脂手术后废弃脂肪，采用酶解法分别提取成纤维细胞（Fb）和脂肪干细胞（ASC）。将Fb分为仅有培养基的空白对照组和另加入含相应终质量浓度纳米银溶液的2 mg/L纳米银组、5 mg/L纳米银组、10 mg/L纳米银组、25 mg/L纳米银组、50 mg/L纳米银组，培养48 h，采用细胞计数试剂盒8检测Fb增殖活性。将Fb分为进行相应处理的0 mg/L含银GelMA水凝胶组、10 mg/L含银GelMA水凝胶组、50 mg/L含银GelMA水凝胶组、100 mg/L含银GelMA水凝胶组，于培养1、3、7 d，同前检测Fb增殖活性。将ASC与GelMA水凝胶混合种植，分为三维生物打印组和非打印组，于培养1、3、7 d，同前检测ASC增殖活性并行活/死细胞荧光染色观察ASC生长情况。以上实验中样本数均为3。于18只雄性4~6周龄SD大鼠背部各制作4个全层皮肤缺损创面，分别设为单纯水凝胶组、水凝胶/纳米银组、水凝胶支架/纳米银组、水凝胶支架/纳米银/ASC组并移植相应支架。分别于伤后4、7、14、21 d，行大体观察并计算创面愈合率（样本数为6）；于伤后7、14 d，对创面行苏木精-伊红染色观察组织病理学改变（样本数为6）；于伤后21 d，对创面行Masson染色观察胶原排列情况（样本数为3）。对数据行单因素方差分析、重复测量方差分析、Bonferroni校正、独立样本t检验。结果不同质量浓度的纳米银溶液中的纳米银颗粒均呈圆形，散在分布，粒径均匀。含不同终质量分数GelMA的含银GelMA水凝胶都呈现大小不一且相互连通的孔隙结构。含终质量分数10% GelMA的含银GelMA水凝胶的孔径明显大于含终质量分数15%和20% GelMA的含银GelMA水凝胶（P值均<0.05）。处理1、3、7 d，含银GelMA水凝胶的体外纳米银释放浓度的变化趋势相对平缓；处理14 d，其体外纳米银释放浓度迅速增加。培养24 h，含0、25、50、100 mg/L纳米银的GelMA水凝胶对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的抑菌圈直径分别为0、0、0.7、2.1 mm和0、1.4、3.2、3.3 mm。培养48 h，2 mg/L纳米银组、5 mg/L纳米银组Fb的增殖活性均明显高于空白对照组（P<0.05），10 mg/L纳米银组、25 mg/L纳米银组、50 mg/L纳米银组Fb的增殖活性均明显低于空白对照组（P<0.05）。与0 mg/L含银GelMA水凝胶组相比，培养1 d，50 mg/L含银GelMA水凝胶组、100 mg/L含银GelMA水凝胶组Fb的增殖活性均明显降低（P<0.05）；培养3 d，50 mg/L含银GelMA水凝胶组Fb的增殖活性明显升高（P<0.05），100 mg/L含银GelMA水凝胶组Fb的增殖活性明显降低（P<0.05）；培养7 d，100 mg/L含银GelMA水凝胶组Fb的增殖活性明显降低（P<0.05）。培养1 d，三维生物打印组的ASC增殖活性与非打印组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；培养3、7 d，三维生物打印组的ASC增殖活性均明显高于非打印组（t值分别为21.50、12.95，P<0.05）。培养1 d，三维生物打印组死亡ASC数略多于非打印组。培养3、5 d，三维生物打印组和非打印组中的绝大多数ASC为活细胞。伤后4 d，单纯水凝胶组和水凝胶/纳米银组大鼠创面渗液较多，水凝胶支架/纳米银组和水凝胶支架/纳米银/ASC组大鼠创面干燥且未见明显感染迹象。伤后7 d，单纯水凝胶组和水凝胶/纳米银组大鼠创面仍有少量渗液，水凝胶支架/纳米银组和水凝胶支架/纳米银/ASC组大鼠创面干燥结痂。伤后14 d，4组大鼠创面上的水凝胶均脱落。伤后21 d，仅单纯水凝胶组仍有少量创面未愈合。伤后4、7 d，水凝胶支架/纳米银/ASC组大鼠创面愈合率均明显高于其他3组（P<0.05）。伤后14 d，水凝胶支架/纳米银/ASC组大鼠创面愈合率明显高于水凝胶/纳米银组和单纯水凝胶组（P值均<0.05）。伤后21 d，单纯水凝胶组大鼠创面愈合率明显低于水凝胶支架/纳米银/ASC组（P<0.05）。伤后7 d，4组大鼠创面上的水凝胶均保持在位；伤后14 d，单纯水凝胶组大鼠的水凝胶已与创面脱离，而其余3组仍有部分水凝胶存在于创面新生组织中。伤后21 d，单纯水凝胶组大鼠创面胶原排列无序，而水凝胶/纳米银组、水凝胶支架/纳米银组、水凝胶支架/纳米银/ASC组大鼠创面胶原排列相对有序。结论含银GelMA水凝胶具有良好的生物相容性及抗菌性能，其三维生物打印的双层结构能更好地与大鼠全层皮肤缺损创面新生组织相融合并促进创面愈合。

异种脱细胞真皮基质敷料治疗烧伤患者创面效果的荟萃分析

游艾佳, 李文婕, 周俊丽, 李春

2023, 39(2): 175-183. doi: 10.3760/cma.j.cn501120-20220106-00008

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摘要:
目的评价异种脱细胞真皮基质（ADM）敷料治疗烧伤患者创面的有效性和安全性。方法采用荟萃分析方法。以“异种脱细胞真皮基质、敷料、烧伤创面、烧伤”为中文检索词检索《中国期刊全文数据库》《万方数据库》《维普数据库》《中国生物医学文献数据库》，以“xenogeneic acellular dermal matrix、dressing、burn wound、burn”为英文检索词检索《PubMed》《Embase》《Web of Science》《Cochrane Library》数据库，收集自建库起至2021年12月公开发表的关于异种ADM敷料治疗烧伤患者创面效果的随机对照试验。结局指标包括创面愈合时间、瘢痕增生比例、温哥华瘢痕量表（VSS）评分、并发症发生比例、植皮比例、细菌检出比例。采用Rev Man 5.3和Stata 14.0统计软件对符合纳入标准的研究进行荟萃分析。结果共纳入16篇文献1 596例烧伤患者，包括接受异种ADM敷料治疗的试验组835例患者和接受其他方式治疗的对照组761例患者。纳入的16项研究偏倚风险不明确。与对照组比较，试验组患者的创面愈合时间明显缩短、VSS评分明显降低（标准化均数差分别为-2.50、-3.10，95%置信区间分别为-3.02~-1.98、-4.87~-1.34，P值均<0.05），瘢痕增生比例、并发症发生比例、植皮比例、细菌检出比例均明显降低（相对危险度分别为0.58、0.23、0.32、0.27，95%置信区间分别为0.43~0.80、0.14~0.37、0.15~0.67、0.11~0.69，P<0.05）。亚组分析显示，对照组干预措施可能是创面愈合时间的异质性来源。瘢痕增生比例不存在发表偏倚（P≥0.05），创面愈合时间、VSS评分、并发症发生比例均存在发表偏倚（P<0.05）。结论异种ADM敷料可缩短烧伤患者创面愈合时间，降低VSS评分、瘢痕增生比例、并发症发生比例、植皮比例、细菌检出比例。

非编码RNA调控糖尿病创面愈合机制的研究进展

李晓亮, 谢江帆, 叶向阳, 李琰光, 刘德伍

2023, 39(2): 184-189. doi: 10.3760/cma.j.cn501225-20221101-00477

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摘要:
糖尿病创面是糖尿病患者的常见并发症，近年来其发病率不断上升，且临床预后较差，严重影响患者的生活质量，逐渐成为糖尿病治疗的重点和难点。非编码RNA作为调控基因表达的RNA，可调控许多疾病的病理生理过程，在糖尿病创面的愈合过程中起着重要作用。该文对3种常见非编码RNA在糖尿病创面愈合过程中的调控作用、诊断价值、治疗潜力进行了综述，从基因层面和分子水平上为糖尿病创面的诊疗提供了新思路。

Wnt/β连环蛋白信号通路在体表创面愈合中的作用机制研究进展

伍倩, 谭晓宇, 王怡佳, 程少文, 崔红旺, 姚江凌

2023, 39(2): 190-195. doi: 10.3760/cma.j.cn501225-20220816-00348

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摘要:
创面愈合是一个缓慢而复杂的生物学过程，包括炎症反应、细胞增殖分化和迁移、血管新生、细胞外基质沉积和组织重塑等。Wnt信号通路可分为经典通路和非经典通路，其中Wnt经典通路又称Wnt/β连环蛋白信号通路，其在细胞分化、迁移和组织稳态维持过程中发挥重要作用。许多炎症因子、生长因子等都参与该通路的上游调控。Wnt/β连环蛋白信号通路的激活在皮肤创面的发生、发展、再生、修复及相关治疗的过程中，起到了重要作用。该文综述了Wnt/β连环蛋白信号通路与创面愈合的关系，并总结了其对炎症反应、细胞增殖、血管新生、毛囊再生和皮肤纤维化等创面愈合重要过程的影响以及Wnt信号通路抑制因子在创面愈合中的作用。

微小RNA在增生性瘢痕中的作用及其机制研究进展

田文融, 左俊, 艾江, 齐郁松, 卜盼盼, 赵皎均, 余扬, 马少林

2023, 39(2): 196-200. doi: 10.3760/cma.j.cn501225-20220508-00179

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摘要:
增生性瘢痕（HS）影响患者功能与美观，给患者带来沉重的心理负担，但其具体的分子生物学水平发病机制尚不明确，因此该病仍然是临床难防难治疾病之一。微小RNA（miR）是一类具有调节基因表达作用的单链内源性非编码RNA。miR在HS的成纤维细胞内的异常转录可影响下游信号通路或蛋白的转导与表达，对miR及其下游信号通路、蛋白的探究有助于深入了解瘢痕增生的发生和发展机制。该文总结并分析近年来miR与多种信号通路如何参与HS的形成与发展，并进一步概述miR与HS中靶基因之间的相互作用。

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2023年第39卷第2期

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