摘要:
目的 建立烫伤后海水浸泡合并创伤弧菌感染脓毒症大鼠模型,为海洋烧创伤脓毒症研究提供实验基础。 方法 该研究为采用析因设计的实验研究。取115只8周龄雄性SD大鼠,按照随机数字表法（分组方法下同）分为模型组（45只）、单纯烫伤组（40只）和假伤组（30只）,前2组大鼠背部均先行烫伤处理,然后分别行人工海水浸泡30 min+创伤弧菌注射、生理盐水注射；后1组大鼠背部先浸入温水做假伤处理,然后注射生理盐水。建模后1、3、5 d,采用苏木精-伊红染色法检测3组大鼠肝、肾、肺、心脏的病理变化,采用半定量评分体系评估前述脏器病理损伤情况；按照试剂盒说明书,采用酶标仪检测3组大鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、尿素氮、肌酐、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）及髓过氧化物酶（MPO）的含量；通过称量3组大鼠新鲜肺组织及其烘干后重量,计算肺湿干比重；采用流式细胞仪检测单纯烫伤组和模型组大鼠外周血中辅助性T细胞、B细胞和细胞毒性T细胞的占比；采用酶联免疫吸附测定法检测3组大鼠血清中白细胞介素-6（IL-6）、IL-10、IL-1β、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等炎症因子表达水平。另取70只8周龄雄性SD大鼠,分为假伤组、单纯烫伤组、烫伤+淡水浸泡组、烫伤+海水浸泡组、烫伤+感染组、单纯感染组、模型组,每组10只。模型组、单纯烫伤组和假伤组大鼠做同前处理；烫伤+淡水浸泡组、烫伤+海水浸泡组大鼠背部先行烫伤处理,然后分别行淡水、人工海水浸泡30 min；单纯感染组大鼠背部经皮下注射创伤弧菌；烫伤+感染组大鼠背部先行烫伤处理,伤后30 min再注射创伤弧菌。建模后7 d内,每天观察大鼠生存情况并计算其生存比例。 结果 建模后1、3、5 d,假伤组大鼠肝、肾、肺、心脏的组织结构基本正常,未见明显病理性损伤；单纯烫伤组大鼠前述脏器组织均存在轻至中度炎症反应,胞质疏松,呈现明显的细胞水肿,但整体结构基本正常；模型组大鼠前述脏器组织均出现明显病理改变,其中建模后3 d最为严重,主要表现为严重的炎症反应、组织损伤,甚至坏死。与假伤组相比,模型组大鼠建模后1、3、5 d肝、肾、肺、心脏病理损伤情况评分均明显升高（P<0.05）；与单纯烫伤组相比,模型组大鼠建模后1 d肝、肾、肺、心脏病理损伤情况评分均明显升高（P<0.05）,建模后3、5 d肝、肾、肺病理损伤情况评分均明显升高（P<0.05）。与假伤组相比,模型组大鼠建模后1 d血清中AST、ALT、尿素氮、肌酐、CK-MB、LDH、MPO含量及肺湿干比重均明显升高（P<0.05）,建模后3、5 d血清中AST、ALT、尿素氮、肌酐、LDH、MPO含量及肺湿干比重均明显升高（P<0.05）。与单纯烫伤组相比,模型组大鼠建模后1 d血清中AST、ALT、尿素氮、肌酐、CK-MB、LDH、MPO含量及肺湿干比重均明显升高（P<0.05）,建模后3 d血清中AST、ALT、肌酐、LDH含量均明显升高（P<0.05）,建模后5 d血清中AST、ALT、肌酐、LDH、MPO含量均明显升高（P<0.05）。建模后1、3、5 d,与假伤组相比,模型组大鼠外周血中辅助性T细胞、B细胞、细胞毒性T细胞占比均明显降低（P<0.05）。建模后1、3、5 d,模型组大鼠血清中IL-6、IL-10、IL-1β、TNF-α表达水平均明显高于假伤组和单纯烫伤组（P<0.05）。建模后7 d,模型组大鼠的生存比例仅为5/10,而假伤组和单纯感染组大鼠的生存比例均为10/10。建模后7 d内,模型组大鼠生存比例显著低于假伤组、单纯烫伤组、烫伤+淡水浸泡组、烫伤+海水浸泡组及单纯感染组（χ2值分别为19.31、12.11、12.33、9.01、17.61,P值均<0.05）,而与烫伤+感染组接近（P>0.05）。 结论 采用烫伤后海水浸泡合并创伤弧菌感染处理可建立脓毒症大鼠模型,该模型大鼠的主要脏器均出现明显病理改变,炎症因子表达水平显著升高,辅助性T细胞、B细胞、细胞毒性T细胞等免疫细胞占比均明显降低,生存比例显著降低,是可靠的实验动物模型。
邓碧涵, 成鑫月, 祝筱梅, 等. 烫伤后海水浸泡合并创伤弧菌感染脓毒症大鼠模型的构建[J]. 中华烧伤与创面修复杂志, 2026, 42(2): 143-152. DOI: 10.3760/cma.j.cn501225-20251017-00432.
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